参数规格:
产品名称
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鹅细小病毒荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015215
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡哌酸(标准品)Pipemidic acid质量规格:供检查用
豹猫肺成纤维样细胞;LCL3盐酸氟奋乃静(标准品)FLUPHENAZINE 质量规格:供HPLC法含量测定用
SPC-A1细胞,人肺腺癌细胞 绿猴肾细胞,Vero细胞 CM-M034小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基100mL鸦胆子苦醇(标准品)(+)-Brusatol质量规格:HPLC>98%,标准品
Sf-9(昆虫细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸哌唑嗪(标准品)Prazosin HCl质量规格:含量测定
NHEK.f-c 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)少年,单一来源 500,000cells 原代神经胶质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml7-羟基7-Hydroxycoumarin质量规格:≥97%,BR
16HBE细胞,人支气管上皮细胞 化学转化小鼠鼻咽上皮细胞,TMNE细胞 CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2酸钾shēng huà shì jì容量:1克
U-87 MG(人神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×22,3-二基丁烷 标准品 2,3-DIMqTHYLBUTcNq1979/9/8
HVMF-c 人类绒毛间质成纤维细胞(HVMF) 500,000cells 肾系膜细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)碳酸铜shēng huà shì jì容量:RT5克
成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)dNTPMIX100mMSOLUTIONpH7.0dNTP混合溶液,100 mM , pH 7.0超级40 M897
PRELP
Others Human 人 PRELP 人细胞裂解液 (阳性对照) 5680-80-8L-丝酸盐酸盐L-Serine metxyl ester xy7nochloride
鹅细小病毒荧光PCR检测试剂盒小鼠小脑星形胶质细胞MA-cL-天冬素一水,英文名或英文缩写:L-Asparagine Monohydrate,级别:BR,99%,规格:10克
G-7细胞,小鼠骨骼肌肌肉母瘤细胞 人肾癌细胞,GRC-1细胞 人小气道上皮细胞HSAEpiC3-录-1-炳醇 98% 3-Chloro-1-propcnol 67-30-2
小耳猪肾细胞;SEPfkRIBOZOLME(MICROENRICHED)RIBOZOL ME粉色至深粉色透明液体RTsigma
OPCML
Others Human 人 OPCML 人细胞裂解液 (阳性对照) L(+)-2-基,英文名或英文缩写:L-2-Aminobutyric acid,级别:BR,98.5%,规格:25克
CM-R100大鼠脑动脉血管内皮细胞完全培养基100mL132-53-62-亚硝基-1-酚;β-亚硝基-α-酚2-nitnoso-1-naphthol;1,2-Naphthoinoneone-2-oxiMe;1,2-NaphthoinoneoneiMine-2-oxiMe;C.I. 10010
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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