注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研 参数规格：
产品名称
副鸡嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015219
产品运输：低温运输 产品保存：-20℃保存 产品有效期：一年 产品特点： ◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增； ◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝； ◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测； ◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程： 一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 使用方法： 注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理（样本处理区） 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。 2. 扩增试剂准备（PCR前准备区） 取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区） 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。 SELPLG Others Human 人 RPSGL-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸异丙嗪质量规格：>98%,进分Promethazine
CM-M094小鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基100mL阿戈美拉汀（II型）质量规格：>99%，II晶型Agomelatine
MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人细胞裂解液 (阳性对照) 派洛宁Y(Ind Grade)质量规格：Ind GradePyronin Y
小鼠膀胱上皮细胞完全培养基 100mL鱼精蛋白硫酸盐来源于鲑鱼 质量规格：Grade II,sigma分装Protamine sulfate from Salmom
4T1小鼠癌细胞 Mouse breast cancer cell 4T1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS5-溴-4-氯-3-吲哚基1酸盐钠盐(分子生物学级)质量规格：分子生物学级BCIP, di salt 双位点HC-kit受体细胞株;DMF7盐酸地匹福林（标准品）质量规格：含量测定Dipivefrin
PTH1R Others Human 人 PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基麦冬黄酮A（标准品）质量规格：HPLC≥98%,标准品Methylophiopogonone A
NCI-H1650 人非小细胞肺癌细胞喷昔洛韦（标准品）质量规格：含量测定Penciclovir
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞贝那普利拉/苯那普利拉（标准品）质量规格：供HPLC法系统适用性试验用Benazeprilat
THPO Protein Human 重组人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)奥美拉唑硫化物质量规格：美国进口Omeprazole Sulfide 副鸡嗜血杆菌荧光PCR检测试剂盒3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2L(-)Fucose6-脱氧-L-半乳糖5克高，99%
MME Others Human 人 CD10 / MME / Neprilysin 人细胞裂解液 (阳性对照) 3,5-二录本安 3,5-Dichlorocnilinq 66-43-7
SK-MEL-1, 人皮肤色素瘤细胞H-Pro-OMeoHClL-卟啉盐酸盐5克特，98.5%
SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人细胞裂解液 (阳性对照) CoenzymeQ10癸1醌1克BR，1000u/ul
人胚肺二倍体细胞;HEL-1(L-本酸)