注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称
|
鸡痘病毒荧光PCR检测试剂盒
|
英文名称
|
详见说明
|
货号
|
BJ-R015223
|
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
IL1B Protein Rat 重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)L-脯氨酸苄酯盐酸盐质量规格:>98%,BRL-Proline benzyl ester
NCI-H524(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人脐静脉血管内皮细胞)L-精氨酸-L-谷氨酸盐质量规格:>98%,BRL-Arginine L-glutamate
CL-0336FC33(人胚胎肾细胞(Asp-2基因修饰))5×106cells/瓶×2L-精氨酸-α-酮戊二酸盐(2:1)质量规格:>98%,BRL-Arginine AKG 2:1
CS Others
Human 人 Ciate syhase / CS 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L-谷氨酸-5-甲酯质量规格:0.98L-Glutamic acid 5-methyl ester
人肠平滑肌细胞总RNAHISMC NAN-乙酰-L-亮氨酸质量规格:>99%N-Acetyl-L-leucine
人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y 人牙周膜成纤维细胞完全培养基 100mL2,5-二溴硒酚(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)2,5-Dibromoselenophene
人小脑颗粒细胞cDNAHCGC cDNA2,6-二溴萘(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)2,6-Dibromonaphthalene
CDH1
Others Mouse 小鼠 CDH1 / E-cad / CD324 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,3-二溴-7-叔丁基芘(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene
Ana-1 小鼠巨噬细胞6,12-二溴屈(>98.0%(HPLC))质量规格:>98.0%(HPLC)6,12-Dibromochrysene
CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×22',3'-二脱氧尿苷(ddU)质量规格:>98%,进分2',3'-Dideoxyuridine
鸡痘病毒荧光PCR检测试剂盒人脊柱间充质干细胞HVMSC环扶哌酸,英文名或英文缩写:Ciprofloxacin,级别:BR,20u/mg,规格:25克
JEG-3/VP16细胞,人绒癌细胞耐药株 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞,NBTF细胞 人羊膜间充质基质细胞HAMSC日当药黄素 Swertiajaponin (HPLC,≥98%) 6980-25-2 20MG 标准品
IM-9(人外周血B细胞) 5×106cells/瓶×2醋醋拂轻可的 Fludrocortisonq ccqtctq 214-36-3
95-D(人高转移肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099人上皮细胞完全培养基100mL 人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1L-MINEL-甲(蛋酸)美国药典级100G63-68-3COLD
CM-R039大鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基100mL硅藻土型色谱载体 SGas-chrom S
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报