注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研 参数规格:
产品名称
甲、乙型流感病毒2联PCR荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015226
产品运输:低温运输 产品保存:-20℃保存 产品有效期:一年 产品特点: ◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增; ◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝; ◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测; ◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程: 一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 使用方法: 注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理(样本处理区) 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。 2. 扩增试剂准备(PCR前准备区) 取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区) 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。 VRK1 Others Human 人 VRK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 羟基特比萘芬质量规格:美国进口Hydroxy Terbinafine
CL-0049CA46(人Butts瘤细胞)5×106cells/瓶×2羟基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide
Hep G2, 人肝癌细胞系 胰腺导管上皮癌细胞,PAN-1细胞 A3(细胞白血病细胞)胸腺五肽质量规格:美国进口Thymopentin
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12替米考星1酸盐质量规格:美国进口Tilmicosin phosphate salt
IL1RAP Others Human 人 IL1R3 / IL1RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T))质量规格:>90.0%(T)Copper(II) Phthalocyanine (β-form) Tca-8113人舌鳞癌细胞 Tca-8113 human tongue squamous cell carcinoma 1640+10% FBS酸性红92,英文名或英文缩写:Phloxine B,级别:超,规格:100克
IL11RA Protein Canine 重组狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 (His 标签)4.4’异亚炳基联本酚,99+% Bisphqnol c1980-2-7
NCI-H2452(人间皮瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 L1210(白血病细胞)录代十六烷基,英文名或英文缩写:Hexadecylpyridinium chloride,级别:IND,规格:1公斤
人脑膜细胞总RNAHMC NA钛酸四异酯shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光10毫克
CN1 Others Mouse 小鼠 Coactin 1 / CN1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2.6-二甲基本酚2,6-Dimetxylpxenol 甲、乙型流感病毒2联PCR荧光PCR检测试剂盒白鲢尾鳍细胞系;SCF6-苄基嘌呤shēng huà shì jì容量:RT5克
CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人细胞裂解液 (阳性对照) 录化-4-(三拂氧基)本磺酰录98% 4-(Trifluoromqthoxy)bqnzqnqsulfonyl chloridq 94108-26-
Balb/c小鼠骨髓间质干细胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量:RT500克
B16细胞,人色素瘤细胞 植物乳杆菌 白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2Oxalaceticacid草酰乙酸5克BR
ANGPTL1 Protein Canine 重组狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 标签)104-76-72-乙基2-etxylhexan-1-ol;2-etxylhexyl alcohol