参数规格:
产品名称
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甲型流感 / 乙型流感 / 丙型流感病毒荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015227
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡萄糖-6-1酸脱氢酶,硫酸铵悬浮液质量规格:酶活>200 NADP units/mg,BCGlucose-6-phosphate dehydrogenase
CM-H022人前列腺成纤维细胞完全培养基100mL苹果酸脱氢酶(>12,000U/ml,BC)质量规格:>12,000U/ml,BCMalate dehydrogenase
BBOX1
Others Human 人 BBOX1 / Gamma-BBH 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 草甘膦标准溶液(10μg/ml,u=2%)质量规格:10μg/ml,u=2%N-(Phosphonomethyl)glycine
solution
支气管成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)辛(分析标准品,99%)质量规格:分析标准品,99%Phoxim
恒河猴肾细胞;RM-1 人胰腺癌细胞,HPAC细胞 SGC-7901(胃腺癌细胞)除草标准溶液(10μg/ml,u=5%)质量规格:10μg/ml,u=5%Nitrofen solution
人微血管内皮细胞RNAHDMEC miRNA5 μgβ-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 3'-1酸钠盐水合物质量规格:美国进口β-Nicotinamide adenine dinucleotide
3'-phosphate salt hydrate
PROM1
Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照) 腺嘌呤盐酸盐质量规格:美国进口Adenine
家兔肾细胞;RABK3硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸质量规格:美国进口Thionicotinamide adenine dinucleotide
HIC细胞,人小肠癌细胞系 荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞,U2OS-Luc teT-on细胞 人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T](R)-9-[2-(二乙基1酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤质量规格:美国进口(R)-9-[2-(Diethylphosphonomethoxy)propyl]
Adenine
HL-60(人早幼粒急性白血病细胞) 5×106cells/瓶×27-二去甲基米诺环素二盐酸质量规格:美国进口7-Didemethyl Minocycline Di
甲型流感 / 乙型流感 / 丙型流感病毒荧光PCR检测试剂盒HuT 78(人T细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2苹果酸脱氢酶测试盒(测组织)100支/包
6T-CEM (人T细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H075人肾足突细胞完全培养基100mL 人结膜成纤维细胞RNAHConF miRNA5 μg四氮坐醋 1H-Tqtrczolq-1-ccqtic ccid 173-17-
CM-R063大鼠肾小球内皮细胞完全培养基100mL血清兔抗人IgG,F(ab)21公斤RT
EPHA3
Others Mouse 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) TG-SDS-BUFFER,10XREADY-PACKTG-SDS缓冲液, 干粉蛋白组学级白色粉末RTsigma
大鼠小脑星形胶质细胞RA-c4-溴-1-硝基本1-Bromo-4-nitnobenzene
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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