柯萨奇病毒荧光PCR检测试剂盒

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格：

产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。
2.加样（样本处理区）
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。
SK-MEL-1(人皮肤色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 V79(中国仓鼠肺细胞)L-天门冬氨酸钾质量规格：>99%,BRL-Aspartate Potassium

CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2辅酶Q10,泛醌质量规格：>98%,BRCoenzyme Q10,Ubiquinone

DCBLD1 Others Human 人 Discoidin / DCBLD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 辅酶Q10(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Coenzyme Q10

多聚赖氨酸 1 mg/mlPLL维生素A醋酸酯（标准品）质量规格：HPLC≥99%，标准品vitamin A acetate

Ovary细胞，人卵巢癌细胞 兔成骨C细胞,IF细胞 胎盘滋养层细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)依泽替米贝β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Ezetimibe β-D-Glucuronide
人脐动脉平滑肌细胞总RNAHUASMC NA低碳硫铁助溶剂shēng huà shì jì容量：RT，避光5克

MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2,4-三基务烷;异忻烷 2,2,4-TriMqthylpqntcnq 240-84-1

人腹膜内皮细胞完全培养基 100mLshēng huà shì jì容量：RT25克

PA317细胞，逆转录病毒包装的NIH3T3细胞 A10(大鼠主动脉血管平滑肌细胞) 小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14苞肉培养基基础shēng huà shì jì容量：100毫升

CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)1041-01-63,5-二-L-甲腺酸(-20°C)3,5-Diiodo-L-thyronine
柯萨奇病毒荧光PCR检测试剂盒SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7Streptozotocin链脲菌佐素超级1G18883-66-4

NCF2 Others Human 人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 生物速 Biotin 28-82-2

小气道上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)L-SERINEL-丝酸美国药典级500G56-45-1RT

猕猴皮肤细胞;MMS4 人软组织纤维瘤细胞，TE 115.T细胞 Eca-109(食管癌细胞)L-甘-甘-异白三肽100克RT，避光

人小细胞肺癌细胞;NCI-H209Peptonepeef 500g 国产

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