参数规格:
产品名称
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口蹄疫病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015234
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
IL5 Others Canine 狗 IL5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,3-二丙磺酸钠质量规格:>98%
2,3-dimercapto-1-propanesulfonate
CM-M009小鼠肺大静脉平滑肌细胞完全培养基100mL硫酸铈铵质量规格:AR,>98%Ammonium ceric sulfate
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 小鼠成纤维细胞,3T3/e细胞 J774A1(单核细胞巨噬细胞)硫代乙酰胺质量规格:AR, ≥99.0%Thioacetamide
小鼠前胃癌细胞;MFC磺基罗丹明101质量规格:>97%Sulforhodamine 101;
Sulforhodamine 640
PRMT5
Others Human 人 PRMT5 人细胞裂解液 (阳性对照) 金胺O(标准品)质量规格:检查AURAMINE O
HCT 116人结肠癌细胞 HCT 116 human colon cancer cells
MycCoy's 5A+10%FBSHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封组织学级475MLRT
TNFSF11
Protein Human 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签)玫瑰桃红 R BORDqcUX RqD 2828-33-3
人视网膜色素上皮细胞(HRPEpiC)(5×105 ) HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞 HumanBOC-D-LeucineN-叔丁氧羰基-D-亮酸5克BR,98%
人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7铟,英文名或英文缩写:Indium,级别:AR,98.5%,规格:100毫升
IFNA13
Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人细胞裂解液 (阳性对照) (烟酸
口蹄疫病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒CM-R068大鼠肾小管平滑肌细胞完全培养基100mL维生素C测试盒1000支/包RT
IFNAR1
Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-己1;丁基1 1-Hqxqnq;Hqxylqnq;Butylqthylqnq 29-41-6
小鼠前脂肪细胞完全培养基 100mL血清兔抗鼠血清1包
B16-F0-EGFP
(稳定株)小鼠色素瘤细胞 B16-F0-EGFP (stable sain) of mouse
melanoma cells DMEM+10% FBS+200ug/ml G418wo7iumACETATE,3MSTERILESOLUTION,pH5.2醋酸钠溶液生物技术级透明无色液体RTsigma
IL35
Protein Human 重组人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 标签)4-基乙酸盐酸盐, 98+%NA
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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