注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研 参数规格：
产品名称
蓝舌病毒荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015235
产品运输：低温运输 产品保存：-20℃保存 产品有效期：一年 产品特点： ◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增； ◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝； ◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测； ◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程： 一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 使用方法： 注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理（样本处理区） 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。 2. 扩增试剂准备（PCR前准备区） 取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区） 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。 SK-RC-42细胞，人肾癌细胞 鼠肝癌细胞系,MM45T.Li细胞 人间充质干细胞-脐带琥珀酸甲泼尼龙（标准品）质量规格：含量测定Methylprednisolone hemisuccinate
HEL(人红白细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2六甲蜜胺（标准品）质量规格：含量测定Altretamine
hMSC-UC-c 从脐带基质提取的的人类间质干细胞(hMSC-UC) 500,000cells 大鼠小胶质细胞RM甲氧氯普胺（标准品）质量规格：含量测定Metoclopramide
小鼠骨髓细胞;FDC-P1奥扎格雷钠（标准品）质量规格：供含量测定用Ozagrel
MERTK Others Mouse 小鼠 MERTK / MER 人细胞裂解液 (阳性对照) 佛司可林(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Forskolin Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml酰胺&甲叉双酰胺溶液shēng huà shì jì容量：2～8℃1KU
人表皮角质细胞总RNAHEK NA录化胆减 Cholinq Chloridq 67-48-1
ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 咪唑 (常规) Imidazole (ACS reagent, ≥99%) 288-32-4 100G 通用试剂
KYSE30 人食管癌细胞TTC卵嶙脂吐温80营养琼脂shēng huà shì jì容量：2～8℃10克
CL-0320BC3H1(小鼠脑瘤细胞)5×106cells/瓶×2D-Raffinose 10g/50g/100g/500g 原装 Amresco J392 蓝舌病毒荧光PCR检测试剂盒CM-H038人直结肠平滑肌细胞完全培养基100mLXmol/L盐酸缓冲液，英文名或英文缩写：Xmol/L-xy7nochloric acid Buffer solution，级别：BR，98%，规格：1公斤
CaEs-17, 人食管癌细胞株 癌细胞,SHZ-88细胞 SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓横纹肌肉癌细胞)2-基 2-Mqthylthiophqnq 224-14-3
正常小鼠Leydig细胞;TM3丁酰胆碱酯酶，英文名或英文缩写：BUCHE，级别：BR，2u/ul，规格：100克
CD3D Others Human 人 CD3D 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙二安四乙酸shēng huà shì jì容量：2～8℃250毫克
SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13(蛋白胨)