参数规格:
产品名称
马传染性贫血病毒荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015240
产品运输:低温运输 产品保存:-20℃保存 产品有效期:一年 产品特点: ◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增; ◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝; ◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测; ◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程: 一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 使用方法: 注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理(样本处理区) 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。 2. 扩增试剂准备(PCR前准备区) 取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区) 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。 JEG-3/VP16细胞,人绒癌细胞耐药株 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞,NBTF细胞 人羊膜间充质基质细胞HAMSC罗丹明123质量规格:用于荧光标记Rhodamine 123
IM-9(人外周血B细胞) 5×106cells/瓶×2曲美布汀碱质量规格:>98%,BRTrimebutine base
95-D(人高转移肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099人上皮细胞完全培养基100mL 人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1环草隆(标准品)质量规格:分析标准品Siduron
CM-R039大鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基100mL西玛津(标准品)质量规格:分析标准品Simazine
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 西玛津标准溶液(10μg/ml,u=5%)质量规格:10μg/ml,u=5%Simazine solution 人低分化肺腺癌细胞;GLC-82 [GLC82]琥珀酸钠(标准品)质量规格:含量测定Hydrocortisone succinate
ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人细胞裂解液 (阳性对照) 回拉西坦;茴拉西坦(标准品)质量规格:含量测定Aniracetam
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2卡络磺钠(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Carbazochrome sulfonate
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照) 卡络磺钠质量规格:>98%,BRCarbazochrome sulfonate
胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL表儿茶素没食子酸酯质量规格:HPLC≥98%,BRECG 马传染性贫血病毒荧光PCR检测试剂盒小耳猪肺细胞;SEP-L2nitnosoRsalt亚硝基-R-盐25克BS
NRP1 Others Human 人 NRP1 / Neuropilin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-录本加醋;间录本加醋 3-Chlorobqnzoic ccid 232-80-8
CM-R084大鼠骨骼肌细胞完全培养基100mLMT金属硫蛋白25克BR,1u/mg,液体
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 人细胞裂解液 (阳性对照) CHC碳酸盐500克BR,20%
小鼠破骨细胞完全培养基 100mL过铵;过二铵;高铵AMMoniuM persulfate;APS;PER 注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研