参数规格:
产品名称
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马疱疹病毒4型荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015243
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
CL-0391NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞)5×106cells/瓶×2AEBSF丝氨酸抑制剂质量规格:>98%,BRAEBSF HCl
IL12B
Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人细胞裂解液 (阳性对照) AEBSF(进分)质量规格:>97%,进分TCI A2215AEBSF HCl
人羊膜上皮细胞总RNAHAmEpiC NA盐酸贝他定(进口)质量规格:≥98%,美国进口Bestatin HCl
SKBr-2HL细胞,人癌细胞 鸡胚原代肝细胞,CEL细胞 SGC-7901, 人胃腺癌细胞系N-羟基丁二(>98%,BR)质量规格:>98%,BRN-Hydroxysuccinimide
MuM-2C(人眼脉络色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2没食子酸一水物(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Gallic acid monohydrate
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人细胞裂解液 (阳性对照) 3',5'-苄氧基苯乙酮(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)3',5'-Dibenzyloxyacetophenone
小鼠单核巨噬细胞;J774A.13,5-二甲氧基苄醇(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-1A3 IV型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL3,5-二甲氧基苄溴(>96.0%(GC))质量规格:>96.0%(GC)3,5-Dimethoxybenzyl Bromide
AGS人胃腺癌细胞 Human3,5-二溴-1-基硅基苯(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene
TNFRSF1B
Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人细胞裂解液 (阳性对照) 3,5-二-L-酪氨酸质量规格:>98%,BR3,5-Diiodo-L-tyrosine
dihydrate
马疱疹病毒4型荧光PCR检测试剂盒SHG44细胞,胶质瘤细胞 人SV-40转化肺成纤维细胞,WI-38AV13细胞 膀胱成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)(S)-2,6-二基己酸盐酸盐,英文名或英文缩写:L-Lysine HCL,级别:BR,99%,规格:25克
豹猫皮肤成纤维样细胞;LCS53-溴本;间溴本 3-BroMotoluqnq;3-BroMo-1-Mqthylbqnzqnq;M-Tolyl broMidq 291-17-3
FLT4
Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人细胞裂解液 (阳性对照) HOTSTARTTAQPCRMASTERMIX,2X热启动Taq PCR Master Mix生物技术级无色透明液体 -20 degrees Csigma
CL-0308TE-13(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×25-BrU5-溴尿嘧啶核苷1克高,95%
VNN1
Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 134-32-71-胺;α-胺;α-基;1-基1-NaphthylaMine;Naphthalidine;1-NaphthalenaMine;α-NaphthylaMine
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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