注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研 参数规格:
产品名称
幽门螺旋杆菌荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015262
产品运输:低温运输 产品保存:-20℃保存 产品有效期:一年 产品特点: ◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增; ◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝; ◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测; ◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程: 一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 使用方法: 注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理(样本处理区) 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。 2. 扩增试剂准备(PCR前准备区) 取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区) 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。 RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺二甲嘧啶质量规格:≥99%,BRSulfamethazine
小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3磺胺二甲嘧啶 (标准品)质量规格:≥99%,标准品Sulfamethazine
CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照) 糖精(标准品)质量规格:校准温度计用Saccharin
Caco-2,人结直肠腺癌细胞酚酞(标准品)质量规格:熔点测定Phenolphthalein
NEI-H209细胞,小细胞肺癌细胞 人前列腺癌细胞,22RV1细胞 人脉络丛成纤维细胞RNAHCPF miRNA5 μg磺胺(标准品)质量规格:检查Sulfanilamide SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人细胞裂解液 (阳性对照) L-盐酸半胱酸,英文名或英文缩写:L-Cysteine metxyl ester xy7nochloride,级别:BR,99%,规格:25克
CM-R082大鼠骨细胞完全培养基100mL加醋苄酯;蚁醋苄酯 Bqnzyl forMctq;ForMic ccid bqnzyl qstqr; 104-27-4
BSG823细胞,人胃癌细胞 人神经上皮瘤细胞,SK-N-SH细胞 瘤牛皮肤细胞;BIN-S1葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-100 Medium 9050-94-6 25G 分离试剂
CNE(人鼻咽癌细胞) 5×106cells/瓶×2ABTSdiammoniumsalt2,2'-连氮基-双-(3-乙基本并二氢噻唑啉-6-磺酸)二盐5克超,98%
FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B 人细胞裂解液 (阳性对照) (顺二酸钠(马来酸钠)) 幽门螺旋杆菌荧光PCR检测试剂盒QBC-939, 人胆管癌细胞PVDF膜1 O.D.
CDK4 Others Human 人 CDK4 / CMM3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5-录-1-基-4-肖基咪坐 5-Chloro-1-mqthyl-4-nitnoimidczolq 4897-2-0
人永生化细胞;CNLMG-B5538LCL-精酸L-谷酸盐1公斤
NCI-N87细胞,人胃癌细胞 人细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD6细胞 CL-0387MS751(人颈表皮癌细胞)5×106cells/瓶×2司盘6025毫克2~8℃
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA(酸钠)