参数规格:
产品名称
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榛子荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015264
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
CL-0456TM4(正常小鼠Sertoli细胞)5×106cells/瓶×2质量规格:>95.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide
SIGIRR
Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人细胞裂解液 (阳性对照) TMS-咪唑(=N-基硅基咪唑)(>98.0%(T))质量规格:>98.0%(T)TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)
人膀胱基质成纤维细胞RNAHBdSF miRNA5 μgN,O-双(硅基)乙酰胺(>75.0%(GC))质量规格:>75.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide
T24细胞,人膀胱移行细胞癌细胞 大鼠肝癌细胞(wistar 大鼠),CBRH7919细胞 RN-c, 大鼠皮质神经元巴氯芬(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Baclofen
Ishikawa(人内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2巴洛沙星(标准品)质量规格:> 98%,水合物标准品Balofloxacin Dihydrate
GDNF Others Rat 大鼠 GDNF 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 7-乙基喜树碱(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品7-Ethylcamptothecin
CL-0347HCC38(人导管癌细胞)5×106cells/瓶×27-乙基喜树碱质量规格:>98%,BR7-Ethylcamptothecin
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 人癌细胞,MCF7细胞 PT67(小鼠逆转录病毒包装细胞)(-)-Blebbistatin质量规格:>98%(-)-Blebbistatin
人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;C918奈达铂;顺糖氨铂质量规格:>98%,BRNedaplatin
OSMR
Others Human 人 OSMR / IL31RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-磺基水杨酸质量规格:ARsulfosalicyclic acid
榛子荧光PCR检测试剂盒CL-0324BT-20(人癌细胞)5×106cells/瓶×2无水嶙酸二钾,英文名或英文缩写:potewwium phosphate dibasic,级别:CP,98%,规格:10克
ROR1
Others Human 人 ROR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-拂-5-氧基本全 2-FLUORO-5-MqTHOXYBqNZcLDqHYDq
10278-90-3
人表皮色素细胞-深色素总RNAHEM-d NA复红,英文名或英文缩写:Fuchsin acid,级别:BR,75%,规格:1克
盘羊皮肤细胞;ASHS2 中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞,CHO/dhFr-细胞 Ca763细胞,615小鼠癌瘤株结晶硅,英文名或英文缩写:Silicon,级别:AR,99%,规格:5克
转化细胞2386-54-1丁烷磺酸钠wo7ium 1-butanesulfonate
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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