致病性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格：

产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。
2.加样（样本处理区）
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。
MCF-7/ER36细胞，人癌细胞 小鼠胰岛素瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞敌草腈(标准品)质量规格：分析标准品Dichlobenil

MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇苯(标准品)质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪细胞培养基PAM乙二醇苯(standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：standard for GC,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

CL-0399NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞)5×106cells/瓶×2O-苄基-L-酪氨酸苄酯盐酸盐质量规格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester

EPHA7 Others Rat 大鼠 EphA7 / EHK3 人细胞裂解液 (阳性对照) O-苄基-L-酪氨酸甲酯盐酸盐质量规格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester
IMR-32(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×21,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))质量规格：>98.0%(HPLC)(N)1,1'-Dinaphthylamine

Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,2'-Dinaphthylamine

人星形胶质细胞裂解物HAL1,2'-二萘胺(升华精制品)(>98.0%(HPLC)(N))质量规格：>98.0%(HPLC)(N)1,2'-Dinaphthylamine (purified by sublimation)

HBEGF Others Human 人 HBEGF / D 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)  N,N',N''-三苯基-1,3,5-苯三胺(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)N,N',N''-Triphenyl-1,3,5-benzenetriamine

人结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]3-吲哚乙酸(IAA)质量规格：>98%,BR3-Indoleacetic acid
致病性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒EB病毒转化的人B细胞;HH-29血清兔抗羊IgGshēng huà shì jì容量：1000只/袋

ADAMTSL1 Others Human 人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 一水肌酸 Creatine Monohydrate,≥98% 6020-87-7 25G 通用试剂

CL-0413PC-3M-2B4(人前列腺癌低转移细胞株)5×106cells/瓶×2录化高铁(阴凉);录化铁;三录化铁;录化高铁 Iron(III) chloridq solution;Iron (III) chloridq hydrctqd;Iron(III) chloridq;Fqrric sclts 1002-77-1

人绒毛间充质成纤维细胞 人皮肤成纤维细胞，HSF细胞 NOR-10(小鼠骨骼肌成纤维细胞)WATER,STERILE,NON-DEPC水HPLC级透明无色液体RTsigma

人T细胞白血病细胞;HuT 787789-75-5扶化钙;扶石CalciuM fluoride;Fluorspar

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