参数规格:
产品名称
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猪蓝耳病病毒PCR试剂盒荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015272
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
CM-H011人肺成纤维细胞完全培养基100mL甲基帕罗西汀质量规格:>99%N-Methyl Paroxetine
CD55
Others Mouse 小鼠 CD55 / DAF 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸头孢喹诺质量规格:干品Cefquinome>80%,BRCefquinome sulfate
胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解缓冲液) 10mL吡罗昔康(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Piroxicam
TT人甲状腺导管癌细胞 TT human thyroid duct carcinoma cells F-12K+10%FBS泊沙康唑质量规格:>99%Posaconazole
IL21
Protein Canine 重组狗 IL21 / Ierleukin 21 蛋白泊沙康唑(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Posaconazole
NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1酸腺嘌呤,维生素B4质量规格:>98%,BRAdenine phosphate
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5 质量规格:>98%,BRHypoxanthine
TE-10细胞,食管癌细胞 人食管癌细胞,TE-10细胞 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21鸟嘌呤 质量规格:>99%,BRGuanine
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B5鸟嘌呤 (标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Guanine
PDGFRA
Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-姜1酚(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品6-Shogaol
猪蓝耳病病毒PCR试剂盒荧光PCR检测试剂盒CNE细胞,鼻咽癌细胞 人胚肺成纤维细胞,HFL-I细胞 原代骨骼肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml嶙酸二氢钙,英文名或英文缩写:Calcium hypophosphite,级别:AR,99%,规格:1克
豹猫肺成纤维样细胞;LCL32-去氧-D-葡萄糖 2-Dqoxy-D-glucosq 124-17-6
HA Others
H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 金丝雀黄O,英文名或英文缩写:Aunemine O,级别:CP,99.5%,规格:100毫克
CL-0329Chang
liver (CCL13) (人张氏肝细胞)5×106cells/瓶×2胰酶粉100克
CNDP1
Others Mouse 小鼠 CNDP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 89-25-83-甲基-1-本基-2-吡唑啉-5-酮;1-本基-3-甲基-5-吡唑啉酮;本基甲基氮茂-5-酮3-metxyl-1-pxenyl-2-pyrazolin-5-one;1-pxenyl-3-metxyl-5-pyrazolone;3-metxyl-1-pxenyl-5-pyrazolone
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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