注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研 参数规格：
产品名称
猪流行性腹泻病毒定量RT-荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015277
产品运输：低温运输 产品保存：-20℃保存 产品有效期：一年 产品特点： ◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增； ◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝； ◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测； ◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程： 一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 使用方法： 注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理（样本处理区） 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。 2. 扩增试剂准备（PCR前准��区） 取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区） 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B磺胺嘧啶(标准品)质量规格：含量测定Sulfadiazine
ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺嘧啶质量规格：>99%,BRSulfadiazine
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF炔诺孕酮（标准品）质量规格：含量测定Norgestrel
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人细胞裂解液 (阳性对照) BML-275 HCl,物质C盐酸盐质量规格：>98%,AMPK选择性抑制剂Dorsomorphin 2HCl;BML275.HCL;Compound C
人小肠平滑肌细胞完全培养基 100mL黄杨碱/环维黄杨星D（标准品）质量规格：滴定法≥99%，标准品Cyclovirobuxine 人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H157L-α-N-乙酰基-β-吲哚，英文名或英文缩写：N-Acetyl-L-tryptophan，级别：BR，98%，规格：10克
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 录加醋苄酯 Bqnzyl xlonofonmctq 201-23-1
人肝星形细胞完全培养基 100mL葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-15 11081-40-6 25G 分离试剂
Lewis细胞，小鼠肺癌细胞 CHL/IU [ CHL-11 ](中国仓鼠肺细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A溴代十二烷基，英文名或英文缩写：DTAB，级别：IND，规格：100克
XCL1 Protein Human 重组人 XCL1 蛋白 (His 标签)Maleicacid 100g/250g/500g/1kg Sigma M0375 猪流行性腹泻病毒定量RT-荧光PCR检测试剂盒PC-12(高分化) 大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(高分化)1-Chlorodecane1-录癸烷25克AR，98%
CA4 Others Human 人 CA4 / Car4 / CAIV 人细胞裂解液 (阳性对照) 轻氧化钴 Cobclt xy7noxidq 167-21-4
大额牛肺细胞;BFR-L1Piper100毫克GR，99%
LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人细胞裂解液 (阳性对照) RAPIDWESTERNBLOTTINGKIT-RABBIT-WT快速Western Blotting试剂盒-兔(湿转)01 KitRT/Secondary antibodies stored FROZEN
HSC 人胃癌细胞AmphotericinB 100mg原装/500mg/1g原装 INALCO1758-9313