参数规格:
产品名称
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猪脑心肌炎病毒荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015278
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 诺氟沙星盐酸盐质量规格:含量大于98.5%Norfloxacin HCl
胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL诺氟沙星盐酸盐(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Norfloxacin HCl
U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒构建稳定株)人脑神经胶质瘤细胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7]
(leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 灭清+2μg/ml puromycin丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽质量规格:>98%,BRAla-Gln
IL21
Protein Rat 重组大鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 标签)L-精氨酸甲酯二盐酸质量规格:>99%,BRH-Arg-OMe·2HCl
人表皮角质细胞-新生儿(HEK-n)( 5×105 ) 细胞名称 种属D-丙氨酰胺盐酸盐质量规格:>98%,BRD-Alaninamide
KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株;B222',3'-双脱氧腺苷(ddA)质量规格:>98%,BRDideoxyadenosine
ZR-75-30细胞,癌细胞 人食管癌细胞,TE-11细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1木糖醇质量规格:>98.5%,ARXylitol
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B6木糖醇(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Xylitol
ERBB2
Others Human 人 ErbB2 / HER2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2',3'-二脱氧胸苷(ddT)质量规格:>98%,进分2',3'-Dideoxythymidine
人内皮细胞总RNAHDLEC NA7,8-二氢-L-生物蝶呤质量规格:美国进口7,8-Dihydro-L-biopterin
猪脑心肌炎病毒荧光PCR检测试剂盒IL17A
Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白砷试剂,英文名或英文缩写:AgDDTC,级别:高,98%,规格:25克
人少突胶质前体细胞(HOPC-os)(悬浮生长) 人间充质干细胞-脐带 U251人胶质瘤细胞二本同 2-Phqnylccqtophqnonq 421-40-1
CM-H105人皮下脂肪细胞完全培养基100mLD-本盐酸盐,英文名或英文缩写:D-pxenylalanine metxyl ester
xy7nochloride,级别:BR,98%,规格:25克
IFNA4
Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人细胞裂解液 (阳性对照) Nickelicoxide色氧化镍1克AR,99%
人支气管平滑肌细胞HBSMCIndoxyl-GlucuronideCHASalt 10mg原装/100mg原装 INALCO1758-1377
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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