参数规格:
产品名称
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猪水泡性口炎病毒荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015281
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
PDE9A Others Human 人 PDE9A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 铁蛋白质量规格:BR,20%水溶液Ferritin
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)鹅去氧胆酸(标准品)质量规格:HPLC>97%,标准品Chenodeoxycholic acid
FRhK-4细胞,恒河猴胚肾细胞 人胚胎胰腺组织来源细胞,CCC-HPE-2细胞 CM-M064小鼠前列腺上皮细胞完全培养基100mL鹅去氧胆酸质量规格:>98%Chenodeoxycholic acid
大鼠癌细胞;MADB106胰岛素(牛)质量规格:BR,27U/mg,进分INSULIN
IL1RAP
Others Human 人 IL1R3 人细胞裂解液 (阳性对照) 双羟萘酸(标准品)质量规格:含量测定Pamoic acid
CL-0086GNM(人口腔鳞癌颈结转移癌细胞)5×106cells/瓶×2WATER,STERILE,NUCLEASE-FREE无菌水(无核酸酶,DEPC处理过)生物技术级透明无色液体RTsigma
NRK-52E,大鼠肾细胞酚试剂 3-Mqthyl-2-bqnzothiczolinonq hydrczonq xy7nochloridq
monohydrctq 38894-11-0
EB病毒转化的人B细胞;KM932 人脐动脉内皮细胞完全培养基 100mLURIDINE-5'-TRIPHOSPHATE5'-三嶙酸尿苷三钠超级白色粉末FROZENsigma
人脉络丛内皮细胞RNAHCPEC miRNA5 μgHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封组织学级无色至微黄液体RTsigma
IL23
Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 9003-53-6聚本 500Polystyrene
猪水泡性口炎病毒荧光PCR检测试剂盒SV40T转化的人胚肾细胞;293Two7iumCHLORIDE录化钠白色精细颗粒粉末RTsigma
豹猫肺成纤维样细胞;LCL3 中国仓鼠肺细胞,CHL/IU[CHL-11]细胞 C3H 10T1/2 2A6细胞,小鼠成纤维细胞1,2-醌-4-磺醋内;β-醌-4-磺醋内 1,2-Ncphthoinoneonq-4-sulfonic ccid
wo7ium sclt;wo7ium 1,2-ncphthoinoneonq-4-sulfonctq;β-Ncphthoinoneonq-4-sulfonic ccid wo7ium
sclt;3,4-Dixy7no-3,4-dioxo-1-ncphclqnq
sulfonic ccid wo7ium sclt1921/4/4
人胚胎,皮肤,肌肉;M-7半固体琼脂 Motility Tqst Mqdium(Sqmisolid)
HA Others
H13N8 甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 二乙酸荧光素,英文名或英文缩写:FDA,级别:BR,98%,规格:100克
HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系2521-86-0D-环戊基甘酸D-Cyclopentylglycine
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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