注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研 参数规格：
产品名称
猪圆环病毒Ⅰ型荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015284
产品运输：低温运输 产品保存：-20℃保存 产品有效期：一年 产品特点： ◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增； ◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝； ◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测； ◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程： 一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 使用方法： 注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理（样本处理区�� 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。 2. 扩增试剂准备（PCR前准备区） 取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区） 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。 YAC-1细胞，瘤细胞 人结肠腺癌细胞,HT-29细胞 CM-H021人前列腺平滑肌细胞完全培养基100mL甾醇；(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Ergosterol
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1甾醇(90%)质量规格：>90%,BRErgosterol
GFRA1 Others Mouse 小鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 蔓荆子黄素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Vitexicarpin
雪旺氏细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)芒果苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Mangiferin
ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 吗替麦考酚酯-d4质量规格：美国进口Mycophenolate Mofetil-d4 ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人细胞裂解液 (阳性对照) L-α-基-β-羟基，英文名或英文缩写：L-Threonine，级别：BR，99%，规格：10克
人色素瘤细胞;A875BOC-L-天门冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用试剂
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 流醋亚铁铵;马尔氏盐;低铁矾;亚铁铵矾;流醋低铁铵;六水合流醋亚铁铵;流醋亚铁铵;六水合流醋铁铵;六水合流醋铁(Ⅱ)铵 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9
人肝窦内皮细胞完全培养基 100mL5′-CTP，4Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸四钠盐溶液5UUSP级，98%
LLC细胞，小鼠肺癌细胞 CHO(中国仓鼠卵巢细胞) 恒河猴肺细胞;RM-L1姆沙伯 P AW DMCSChromosorb P AW-DMCS 猪圆环病毒Ⅰ型荧光PCR检测试剂盒非洲绿猴肾细胞;BS-C-1NZYMBROTH,POWDERNZYM 肉汤, 粉末生物技术级粉末RT不sigma
IFNGR1 Others Human 人 IFNγR1 / CD119 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-溴炳同醋 BroMopyruvic ccid 1113-29-3
豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4詹纳斯绿 B Janus Green B (certified by the Biolog... 2869-83-2 1G 染色剂
IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人细胞裂解液 (阳性对照) 威斯塔霉素，英文名或英文缩写：Ribostamycin Sulfate salt，级别：BR，<62.5 μg/ml，规格：1克
JEG-3 人绒毛膜癌细胞(录化)