其原理是在末端脱氧核糖核苷酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因组DNA断裂时暴露出的3´-羟基（3´-OH）末端掺入生物素（Biotin）标志的dUTP，随后通过Biotin与连接辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺（DAB）的存在下，产生深棕色的不溶物，从而特异准确地定位凋亡的细胞。
本试剂盒可用于石蜡切片、冰冻切片和细胞样本（细胞涂片或爬片）的凋亡原位检测，检测结果可在普通光学显微镜下直接观察计数。 包装清单：
存条件：
Streptavidin-HRP, 4℃, 其余试剂-20 ℃保存，一年有效。
操作步骤：
1、样本处理：
a) 石蜡切片：经二甲笨、酒精脱蜡，复水。脱蜡应充分。
b) 冰冻切片：流水冲洗，去除OCT包埋胶后，用纯水洗3次。
c) 细胞飞片：用组织固定液固定后，用PBS洗三次，每次5分钟。1% Triton X-100处理10分钟，用PBS洗三次，每次5分钟。
2、蛋白酶消化
将1ul 试剂（A）50× Proteinase K稀释于50ul PBS中，滴加到组织上，37℃孵育10-20分钟。消化结束后，用PBS洗三次，每次5分钟。
3、封闭
用3%的双氧水（H2O2）室温封闭10分钟，封闭结束后用PBS洗三次，每次5分钟。
4、阳性对照组织的处理
将组织用DNase I消化，以获得断裂的DNA，即成Tunel染色阳性的对照。阳性对照组织也可以选用小鼠的小肠组织切片。
纯水
46 ul
试剂（B）: 10 × DNase I Buffer
5 ul
试剂（C）: DNase I
1 ul
共计
50 ul
将50 ul DNase I消化液滴加于组织上，37℃孵育10-30分钟，消化结束后，用PBS洗三次，每次5分钟。
5、连接:
连接反应前用50 ul Equilibration Buffer孵育标本5-10分钟。孵育过程中按下表配制连接工作液。去除标本上的Equilibration Buffer后，直接滴加50ul 连接工作液，37℃孵育1-2小时，染色结束后，用PBS洗三次，每次5分钟。
更多信息：TUNEL凋亡检测试剂盒
http://www.bi-gene.com/Products-36090965.html https://www.chem17.com/st431186/product_36090965.html