组织学上,4%PFA穿透力强,固定均匀,能使组织硬化,有利于切片。该固定剂造成的组织收缩少,损伤小,较为温和,能很好的保存固有物质,保持组织的抗原性和细微结构。适用于各种常见细胞或组织的固定,对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖类等。此外,多聚甲醛亦可用于固定和保存脂肪及脂类物质。
电泳转移缓冲液保存条件:
4℃保存,一个月有效;-20℃保存,一年有效。
使用方法:
将组织样品浸泡于4%多聚甲醛固定液中。
为取得较为满意的固定液果,一般固定液的用量不低于固定组织体积的十倍。
缓冲液
使用液(终浓度)
浓贮存液(每升)
Tris-乙酸(TAE)
1×:0.04mol/L Tris-乙酸
50×:242g Tris碱
0.001mol/L EDTA
57.1ml冰乙酸
100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-磷酸(TPE)
1×:0.09mol/L Tris-磷酸
10×:10g Tris碱
0.002mol/L EDTA
15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)
40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-硼酸(TBE)a
0.5×0.045mol/L Tris-硼酸
5×:54g Tris碱
27.5硼酸
20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
碱性缓冲液 b
1×:50mmol/L NaOH
1×:5ml 10mol/L NaOH
1mmol/L EDTA
2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)
Tris-甘氨酸 c
1×:25mmol/L Tris
5×:15.1g Tris
250mmol/L 甘氨酸
94g 苷氨酸(电泳级)(pH8.3)
0.1% SDS
50ml 10% SDS(电泳级)
更多信息:电泳转移缓冲液
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