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上海金鹏分析仪器有限公司
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全自动消化炉和全自动凯式定氮仪对蛋白质的测定
衡量食品的营养成分时, 要测定蛋白质含量。 蛋白质含量测定方法, 目前常用的有凯氏定氮法、 双缩脲法、紫外吸收法和考马斯亮蓝法等。凯式定氮法是目前各大检测机构中较为普遍的方法, 也是 GB 5009.5-2010 中规定的方法之一。 全自动定氮仪 就是根据这一原理而研制的。而在使用凯氏定氮仪过程中样品的取样量有可能直接影响到终的测定数据。
使用全自动消化炉和全自动凯式定氮仪进行蛋白质的测定时,在加酸量、加催化剂量、消化条件以及蒸馏条件都相同的情况下,重要的由人为控制的变量就是取样量。取样量不同,可能会影响消化和蒸馏的结果。例如,测定淀粉中的蛋白质时,如果取样量达到 2.5g 左右,则无法将其消化完全;测定蛋白质粉中的蛋白质时,如果取样量超过 0.65g ,蒸馏滴定时则会因为吸收池液面过高但氨依然没有完全蒸出而影响终的测定结果;测定花粉中的蛋白质时,如果取样量小于 0.2g ,则会因为样品中氨含量过少而大量增加滴定相对误差。由此可见,在蛋白质的测定中,选取合适的取样量是非常重要的。
GB5009.5-2010 中关于取样的描述为称取固体试样 0.2 ~ 2g 、半固体试样 2 ~ 5g 或液体试样 10 ~ 25g (相当于 30 ~ 40mg 氮),至 0.001g 。而使用 凯氏定氮仪 时无需如此大的取样量,故佳取样条件需要摸索。考虑到国标中的阐述,认为佳取样量和蛋白质含量之间应该有一定的比例关系,例如线性关系。但目前尚无相关方面的研究。
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