电泳带型分析

带型

原因分析

解决办法

弱带或无带

上样的DNA量不够

增加DNA的上样量，聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高

DNA降解

避免DNA的核酸酶污染

电泳时间过长，DNA跑出

减短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度

EB染色的DNA，紫外光源不合适

应用短波长（254nm），增强紫外灯灵敏度

DNA带缺失

小DNA带走出凝胶

减短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度

分子大小相近的DNA带不易分辨

增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度

DNA 变性

电泳前请勿高温加热DNA链，以20mM NaCl Buffer稀释DNA

巨大DNA链，凝胶电泳不合适

在脉冲凝胶电泳上分析

DNA带模糊

DNA降解

避免核酸酶污染

DNA上样量过多

减少凝胶中DNA上样量

所用电泳条件不合适

电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力

DNA样含盐过高

电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐

有蛋白污染

电泳前酚抽提去除蛋白

DNA变性

电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

不规则DNA带迁移

对于λ/Hind III片段COS位点复性

电泳前加热DNA 65℃加热5-10分钟，然后在冰上冷却5分钟

电泳条件不合适

电泳电压不超过20V/cm，温度＜30℃，电泳缓冲液有足够的缓冲能力

DNA变性

以20mM NaCl Buffer稀释DNA，电泳前勿加热