蛋白质纯化方法经典攻略（一）

那么下面上海金鹏分析仪器有限公司为大家简单介绍一下关于蛋白质纯化方法经典攻略（一）：

蛋白质纯化工艺的建立

缓冲液是一种含有共轭酸/碱对的水溶液。缓冲液的pH值范围根据其pKa值决定。该pKa值定义为50%的分子为酸式结构，50%为碱式结构时的pH值 （图1）。

Tris 25°C的pKa值是8.06，表示当pH=8.06，50%的Tris是质子化（酸式结构），50%是去质子化（碱式结构）。
关于缓冲液的一个常规原则是，其pH值应保证在pKa值左右1个pH值单位范围内，从而保证其具有良好的缓冲能力。如此可以保证同时有足够的以酸式结构和碱式结构存在的分子在加入 H+ 或者 OH- 时可以将它们中和。这样，缓冲液就可以防止pH变化导致的蛋白质稳定性改变。
一种好的缓冲液必须具有以下特征  :1、水溶性2、化学稳定性3、在所需pH范围内良好的缓冲能力4、与分析和实验应用条件具有良好的兼容性5、与其他溶质具有良好的兼容性
很多物质都可以用于生物缓冲液。*常使用的缓冲液成分通常具有接近中性的pKa值，可在生理pH值范围左右使用。表1列出了4种*常用的生物缓冲液、各自的pH值应用范围及各自可能对蛋白质纯化过程产生影响的优缺点。为保证足够的缓冲能力，这些缓冲液的浓度通常为25mM。

        以上就是上海金鹏分析仪器有限公司为大家整理总结蛋白质纯化方法经典攻略（一）。

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