**印迹immunoblotting又称蛋白质印迹western blot,它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相**测定技术基础上发展起来的一种新的**生化技术。由于**印迹western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相**测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。**印迹western blot常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。闪晶生物为您全套**印迹western blot技术服务和相关的试剂耗材。主要实验步骤如下:
2.蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3.变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳SDS-PAGE:将准备好的样品液和预染蛋白marker分别上样,标准加进个孔中,电泳分离蛋白。4. 蛋白质转移到PVDF膜,按Bio-Rad蛋白转移装置说明组装滤纸凝胶纤维素夹层,30mA恒流条件下,4°C转移过夜。5. western blot膜的封闭和抗体孵育
6. westernblot结果检测:化学发光法检测,膜与化学发光底物孵育,经X胶片曝光显影。图片扫描保存为电脑文件,并用GIS1000分析软件将图片上每个特异条带灰度值的数字化。7. westernblot数据分析:目的蛋白的灰度值除以内参GAPDF的灰度值以校正误差,所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量。8. 实验报告,包括详细的实验方法及**印迹实验结果的相关数据。更详细的操作说明
westernblot费用:每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。每张膜的费用是:1500.00元。一抗另计,其它试剂免费,一抗订购时间约为3周。乘车路线:火车站坐1号地铁到终点站,然后换5号地铁坐到北桥站即可。时间:约2-3周。上海金鹏分析仪器有限公司 电话 www.17bio.com 通过ISO9001:2000认证 以下产品: 核酸蛋白检测仪、紫外检测仪、紫外分析仪、旋转蒸发器、自动纯水蒸馏器、低温恒温槽 循环水真空泵系列、恒流泵系列、自动部分收集器系列、梯度混合仪系列 层析柱系列、溶剂过滤器系列、动物人工呼吸机系列 电热干燥箱、真空干燥箱、红外干燥箱、烘干器、培养箱、霉菌培养箱、振荡培养箱、生化培养箱、光照培养箱、恒温恒湿箱、隔水培养箱、人工气候箱、厌氧培养箱、二氧化碳培养箱、箱式电炉、管式电炉、电热板封闭电炉、万用电炉、高低温试验箱、盐雾试验箱、老化试验箱、调温调湿箱、植物生长箱、分析天平、精密天平、微量天平、电子天平、天平、架盘天平、静水天平、液体比重天平、电子台秤、水份测定仪、机械天平、扭力天平、酸度计、电导率仪、溶氧仪离子计、滴定仪、卡氏水分测定仪、工业在线分析仪、多参数分析仪、电位仪生物显微镜、学生显微镜、荧光显微镜、金相显微镜、体视显微镜、读数显微镜、倒置显微镜、计量检测显微镜、罗维朋比色计、余氯比色计、色差仪、折光仪、比色计、旋光仪、浊度仪、白度仪、雾度仪、光泽度仪、恒温水箱、恒温水槽、振荡水槽、油浴油槽、电热套、防爆冰箱、低温冰箱、液氮容器、致冷器、精密恒温、槽粉尘计、恒温水浴锅、旋转蒸发器、真空泵、电动搅拌器、恒流泵磁力搅拌器、粉碎机、分散乳化均质机、振荡器梯、度混合器、蠕动泵、超净工作台、除湿机空气自净器、**器、通风柜、可见光分光光度计、紫外可见分光光度计、荧光分光光度计、原子吸收分光光度计、碳硫分析仪、火焰分光度计、气相色谱、液相色谱、质谱仪、色谱相关设备、氢气发生器、氮气发生器、气体发生一体机、空气发生器、层析仪、紫外分析、仪离心机、纯水器、收集器、蒸馏水器、显微(细胞)、、电泳仪、电泳槽、生化分析仪、紫外检测仪、酶标仪、洗板机、PCR仪、基因枪、导入仪、超声波细胞粉碎仪、超声波清洗机