主要是:压力异常、漏 液、谱图问题、进样阀的问题。
操作压力的变化往往是故障的征兆。A、没有压力显示,没有流动相流动:
原因 解决方法1、电源问题 接通电源,开机2、保险丝被烧坏 更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败 采取恰当的设定、、修理或更换控制器4、柱塞杆折断 更换柱塞杆5、泵头内有空气 溶剂脱气、启动泵抽出空气6、流动相不足 补充流动相、更换入口滤头7、单向阀损坏 更换单向阀8、漏液 拧紧或更换手紧接头
B、流动相流动正常,但没有压力显示: 原因 解决方法1、仪表损坏 更换仪表2、压力传感器损坏 更换压力传感器
C、压力持续偏高 原因 解决方法1、流速设定过高 调整流速设定2、柱前筛板堵塞 反冲色谱柱、更换筛板、更换色谱柱3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀 使用恰当的流动相、冲洗柱塞杆。4、色谱柱选择不当 选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏 清洗或更换进样阀6、柱温过低 提高温度7、控制器失常 修理或更换控制器8、保护柱阻塞 清洗或更换保护柱9、在线过滤器阻塞 清洗或更换在线过滤器
D、 压力持续偏低: 原因 解决方法1、流速设定过低 调整流速2、系统漏液 确定漏液位置并维修3、色谱柱选择不当 选择恰当的色谱柱4、柱温过高 降低温度5、控制器失常 维修或更换控制器
E、 压力波动: 原因 解决方法1、泵中有气体 溶剂脱气、从泵中除去气体2、单向阀损坏 更换单向阀3、泵密封损坏 更换泵密封4、脱气不充分 重新过滤一遍、溶剂脱气5、系统漏液 确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱 由于流动相粘度的变化引起的压力波动
二) 漏 液 通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题,就必须将接头取下,检查是否损坏(例如,卡套损坏、密封表面有杂质);损坏的接头应该更换掉。A)接头处漏液原 因 解决方法1、接头松动 拧紧2、接头磨损 更换3、接头过紧 拧松,再重新拧紧、更换4、接头被污染 拆下清洗、更换5、部件不匹配 使用同一的配件B)泵漏液原 因 解决方法1、单向阀松动 拧紧单向阀(不必拧的过紧)、更换单向阀。2、接头松动 拧紧接头(不必拧的过紧)3、混合器密封损坏 更换混合器密封、更换混合器。4、泵密封损坏 维修或更换泵密封件5、压力传感器损坏 维修或更换压力传感器6、脉冲阻尼器损坏 更换脉冲阻尼器7、比例阀损坏 检查隔膜,如果漏液立即更换、检查手紧接头,损坏的立即更换8、放空阀的损坏 拧紧放空阀、更换放空阀C)进样阀漏液原 因 解决方法1、转子密封损坏 重新安装或更换进样阀2、定量环阻塞 更换定量环3、进样口密封松动 调整4、进样针头尺寸不合适 使用恰当的进样针5、废液管中产生虹吸 保持废液管高于废液液面6、废液管阻塞 更换或疏通废液管D)色谱柱漏液原 因 解决方法1、尾端接头松动 拧紧接头2、卡套内有填料 拆下、清洗卡套、重新安装3、筛板厚度不合适 使用合适的筛板E)检测器漏液原 因 解决方法1、流通池垫片损坏 更换垫片、避免过大的背景压力(压力降)2、流通池窗破碎 更换窗口3、手紧接头漏液 拧紧或更换4、废液管阻塞 更换废液管5、流通池阻塞 重新安装或更换 三)谱图问题 液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。A)峰拖尾原 因 解决方法1、筛板阻塞 反冲色谱柱、更换进口筛板、更换色谱柱2、色谱柱塌陷 填充填料至色谱柱中3、干扰峰 改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误 调整PH值,一般在3-75、样品与填料表面的溶化点发生反应 加入离子对或碱性修饰剂、更改色谱柱6、柱外效应 调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)使用小体积的流通池7、二级保留效应,反相模式 加入三乙胺(碱性样品)、加入乙酸(或酸性样品)、加入盐缓冲剂(离子化样品)换柱8、缓冲液不合适 使用浓度20-100mM的缓冲液、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液B)峰前延原 因 解决方法1、柱温低 升高柱温,一般为25-40度,不得超过60度2、样品溶剂选择不恰当 使用流动相作为样品溶剂3、样品过载 降低样品含量4、色谱柱损坏 更换新柱C)峰分叉原 因 解决方法1、分析柱污染 可能是柱子污染,再生;入口可能被阻塞,拆下来清洗必要时更换色谱柱。2、样品溶剂不溶于流动相 采取流动相作为样品溶剂。D)峰变形原 因 解决方法1、样品过载 减少样品载量2、样品溶剂选择不恰当 减少进样体积、运用低极性样品溶剂E)额外的峰原 因 解决方法1、样品中有其他组份 正常2、前一次进样的洗脱峰 增加运行时间或梯度斜率、提高流速3、空位或鬼峰 检查流动相是否纯净、使用流动相作为样品溶剂、减少进样体积F)保留时间波动原 因 解决方法1、温控不当 调好柱温2、流动相组分变化 防止变化(蒸发、反应等)3、色谱柱没有平衡 在运行前给予足够的时间平衡色谱柱4、流速变化 重新设定流速5、泵中有气泡 从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当 更换合适的流动相、选择合适的混合流动相
G)基线漂移原 因 解决方法1、柱温波动。 控制好柱子和流动相的温度2、流动相不均匀或纯度不高 使用HPLC级的溶剂、高纯度的盐及添加剂、重蒸水、流动相在使用前进行脱气3、流通池被污染或有气体 用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池4、检测器出口阻塞 取出阻塞物或更换管子5、流动相配比不当或流速变化 更改配比或流速6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 更改流动相时,平衡半小时7、流动相污染、变质 检查流动相的组成、重新配制8、样品中有强保留的物质以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。 重新用水及甲醇清洗柱,除去强留份。10、检测器没有设定在大吸收波长处。 将波长调整至大吸收波长处H)基线噪音原 因 解决方法1、在流动相、检测器或泵中有空气 流动相脱气。强极性溶剂冲洗系统除去气。2、漏液 检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。3、流动相混合不完全 用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂4、温度影响(柱温过高) 减少差异、稳定时间长一点5、在同一条线上有其他电子设备 检查干扰是否来自于外部,加以更正。6、泵振动 在系统中加入脉冲阻尼器7、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 检查流动相的组成。8、流动相各溶剂不相溶 选择互溶的流动相9、检测器/记录仪电子元件的问题 断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。10、流通池污染 清洗流通池11、检测器灯能量不足 更换灯12、色谱柱填料流失或阻塞 更换色谱柱13、流动相混合不均匀或混合器工作不正常 维修或更换混合器I)宽峰原 因 解决方法1、流动相组成变化 重新制备新的流动相2、流动相流速太低 调节流速3、漏液(特别是在柱子和检测器之间) 检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。4、检测器设定不正确 调整设定5、柱外效应影响:柱子过载;检测器对反应时间或池体积响应过大;柱与检测器间管路太长或管路内径太大小体积进样、减少响应时间或使用更小的流通池、使用内径为0.007-0.01的短管路、减少响应时间6、缓冲液浓度太低 增加浓度7、色谱柱污染或失效,塔板数较低 更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以对称的色谱峰,则用强溶剂冲洗旧柱子。8、柱入口塌陷 打开柱入口,填补塌陷或更换柱子9、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰 选择其它类型的色谱柱以改善分离效果10、柱温过低 提高柱温。温度不宜超过60℃12、检测器时间常数太大 使用较小的时间常数J)所有的峰面积都太小原 因 解决方法1、检测器衰减设定过高或过低 减少或增加衰减的设定2、检测器时间常数设定太大 设定较小的时间常数3、进样量太少或太多 增大或减少进样量4、记录仪连接不当 使用正确的连接
四)进样阀的问题
以下问题在使用进样阀过程中有可能发生。A)手动进样阀,转动不灵原 因 解决方法1、转子密封损坏 更换或调整转子密封2、转子太紧 调整转子的松紧度B)手动进样阀,载样困难原 因 解决方法1、进样阀安装不当 重新安装2、定量环阻塞 清洗或更换定量环3、进样器污染 清洗或更换进样器4、管路阻塞 清洗或更换管路
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