应用
本试剂盒适用于污染样品中三聚氰胺的定量分析。
检测原理
本试剂盒的原理为竞争ELISA。利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行**测定。将三聚氰胺HRP标记物、标样及样品提取液加入包被三聚氰胺抗体的试验孔中孵育。在30分钟的孵育过程中,样品中的三聚氰胺与HRP标记物竞争结合三聚氰胺抗体。孵育完后,倾去孔内液体,洗涤除去未结合的三聚氰胺和HRP标记物。每孔加入清澈的底物溶液,结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育20分钟后终止反应,读取各孔OD值。比较未知样品的OD值与标样的OD值,就可计算出样品中的三聚氰胺浓度。
提供的试剂及材料
试剂盒在2-8ºC贮存,于盒上标注日期前用完。
1.用铝箔袋真空包装的96孔板 (12×8条),内含指示干燥剂。
2.浓度分别为 0, 20, 50, 100, 200和 500 µg/L (ppb) 的6瓶三聚氰胺标准液。
3.1 瓶 7 mL 三聚氰胺HRP酶标记物.
4.1 瓶 14 mL 底物.
5.1 瓶 14 mL 停止液. (注意! 1N 盐酸. 勿接触皮肤.)
6.5×浓缩洗液,用去离子水或蒸馏水稀释5倍。
注意事项
1.*好配套使用所提供的试剂,不要同其它公司的产品混用,不要将不同批次的产品混用。
2.不按试验步骤稀释试剂或样品将导致不准确的结果。
3.不要使用过期的产品。
4.使用之前将所有试剂恢复至室温20-280C,但不要放置超过24小时。
5.三聚氰胺是有毒化学物质,请小心处理。
6.终止液是1N盐酸,避免接触皮肤和黏膜。万一溅在皮肤上,立即用大量的水冲洗。
7.与其它分析技术一样(GC、HPLC),阳性结果应用另一种替代方法确认。
试剂盒未提供的材料
1. 蒸馏水或去离子水
2. 可吸取50ul的移液器及吸头
3. 可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸头
4. 吸水纸或相当的吸水材料
5. 带450nm滤光片的酶标仪
6. 计时器
7. 洗瓶
8. 20mM PBS: 0.62gNaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl 蒸馏水定容至1000ml
检测步骤 (注意: 标准及样品*好做平行试验以增加准确度.)
1. 将所有试剂及样品置于室温下,用实验室级的水充满洗瓶。
2. 从铝箔袋中取出相应数量的微孔条,放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。
3. 吸取100ul标样或稀释的样品提取液到相应的微孔。每个样品使用一个新的吸头。每孔加50ul三聚氰胺HRP酶标记物。
4. 轻轻混合60秒,孵育30分钟。
5. 孵育完后,将微孔中的溶液倒入水槽中,用洗液完全充满微孔,震荡后倒掉,重复三次,总共洗板四次。
6. 在吸水纸上拍打,尽可能将水拍干。
7. 每孔加入100ul底物溶液。
8. 孵育20分钟。
9. 每孔加入100ul终止液。
用酶标仪读取450nm下的吸光值
应用
本试剂盒适用于污染样品中三聚氰胺的定量分析。
检测原理
本试剂盒的原理为竞争ELISA。利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行**测定。将三聚氰胺HRP标记物、标样及样品提取液加入包被三聚氰胺抗体的试验孔中孵育。在30分钟的孵育过程中,样品中的三聚氰胺与HRP标记物竞争结合三聚氰胺抗体。孵育完后,倾去孔内液体,洗涤除去未结合的三聚氰胺和HRP标记物。每孔加入清澈的底物溶液,结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育20分钟后终止反应,读取各孔OD值。比较未知样品的OD值与标样的OD值,就可计算出样品中的三聚氰胺浓度。
提供的试剂及材料
试剂盒在2-8ºC贮存,于盒上标注日期前用完。
1.用铝箔袋真空包装的96孔板 (12×8条),内含指示干燥剂。
2.浓度分别为 0, 20, 50, 100, 200和 500 µg/L (ppb) 的6瓶三聚氰胺标准液。
3.1 瓶 7 mL 三聚氰胺HRP酶标记物.
4.1 瓶 14 mL 底物.
5.1 瓶 14 mL 停止液. (注意! 1N 盐酸. 勿接触皮肤.)
6.5×浓缩洗液,用去离子水或蒸馏水稀释5倍。
注意事项
1.*好配套使用所提供的试剂,不要同其它公司的产品混用,不要将不同批次的产品混用。
2.不按试验步骤稀释试剂或样品将导致不准确的结果。
3.不要使用过期的产品。
4.使用之前将所有试剂恢复至室温20-280C,但不要放置超过24小时。
5.三聚氰胺是有毒化学物质,请小心处理。
6.终止液是1N盐酸,避免接触皮肤和黏膜。万一溅在皮肤上,立即用大量的水冲洗。
7.与其它分析技术一样(GC、HPLC),阳性结果应用另一种替代方法确认。
试剂盒未提供的材料
1. 蒸馏水或去离子水
2. 可吸取50ul的移液器及吸头
3. 可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸头
4. 吸水纸或相当的吸水材料
5. 带450nm滤光片的酶标仪
6. 计时器
7. 洗瓶
8. 20mM PBS: 0.62gNaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl 蒸馏水定容至1000ml
检测步骤 (注意: 标准及样品*好做平行试验以增加准确度.)
1. 将所有试剂及样品置于室温下,用实验室级的水充满洗瓶。
2. 从铝箔袋中取出相应数量的微孔条,放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。
3. 吸取100ul标样或稀释的样品提取液到相应的微孔。每个样品使用一个新的吸头。每孔加50ul三聚氰胺HRP酶标记物。
4. 轻轻混合60秒,孵育30分钟。
5. 孵育完后,将微孔中的溶液倒入水槽中,用洗液完全充满微孔,震荡后倒掉,重复三次,总共洗板四次。
6. 在吸水纸上拍打,尽可能将水拍干。
7. 每孔加入100ul底物溶液。
8. 孵育20分钟。
9. 每孔加入100ul终止液。
用酶标仪读取450nm下的吸光值