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MTT检测服务|实验技术服务
日期:2024-11-20 23:36
浏览次数:112
摘要:关键词:MTT检测服务|实验技术服务
简介:世界****MTT检测服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
MTT检测服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。在获得重组蛋白产品的同时,我们也会提供相应的原始数据和原始图片,不需要再额外花费精力重复实验。另一方面,我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:MTT检测服务|实验技术服务 ...
关键词:MTT检测服务|实验技术服务
简介:世界****MTT检测服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
MTT检测服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。在获得重组蛋白产品的同时,我们也会提供相应的原始数据和原始图片,不需要再额外花费精力重复实验。另一方面,我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:MTT检测服务|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
测序实验流程:
MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,在活细胞中作用于线粒体的呼吸链,MTT在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下生成蓝色的formazan结晶,formazan结晶的生成量与活细胞数目成正比,生成的formazan结晶可溶解在DMSO中,利用酶标仪测定570 nm处的光密度OD值,可以反映出活细胞数目和细胞活力。死细胞中由于没有琥珀酸脱氢酶,因此不能还原MTT生成formazan结晶。
优点:经济、灵敏度高,可用于大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
缺点:由于MTT经还原所产生的formazan结晶产物不溶于水,需有机溶剂溶解后才能检测,这不仅使工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且有机溶剂对实验人员也有损害。
①将对数生长期的细胞浓度调整为1~10×104细胞/ml,按103~104个细胞接种于96孔板,每孔100 μl;
②培养细胞24小时后,对其进行不同处理,每个处理设三个平行对照;
③(MTT法)适当培养时间后,取出细胞,倒掉培养液,每孔加入5 mg/ml新鲜配制的MTT溶液,温育4小时,再次倒掉上清液,每孔加入200 ml DMSO,摇匀后,酶标仪检测吸光值。
③(台盼蓝拒染法)适当培养时间后,收集细胞,经台盼蓝染色,在倒置显微镜下计数蓝染及不染色细胞,计算细胞存活率。
应用举例:
1.新药筛选;
2.细胞毒性试验;
3.肿瘤放射敏感性实验。
服务流程:
1.细胞处理;
2.细胞计数;
3.盼兰染色法测细胞活力;
4.MTT法测细胞相对数和相对活力。
注意事项
1、选择适当得细胞接种浓度。
2、避免血清干扰:一般选小于10%的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。
3、设空白对照:与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致,*后比色以空白调零。
MTT实验吸光度*后要在0-0.7之间,超出这个范围就不是直线关系,IC50是半抑制率,意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度,就是IC50。要点:药品2倍稀释,多做梯度.
简介:世界****MTT检测服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
MTT检测服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。在获得重组蛋白产品的同时,我们也会提供相应的原始数据和原始图片,不需要再额外花费精力重复实验。另一方面,我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:MTT检测服务|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
测序实验流程:
MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,在活细胞中作用于线粒体的呼吸链,MTT在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下生成蓝色的formazan结晶,formazan结晶的生成量与活细胞数目成正比,生成的formazan结晶可溶解在DMSO中,利用酶标仪测定570 nm处的光密度OD值,可以反映出活细胞数目和细胞活力。死细胞中由于没有琥珀酸脱氢酶,因此不能还原MTT生成formazan结晶。
优点:经济、灵敏度高,可用于大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
缺点:由于MTT经还原所产生的formazan结晶产物不溶于水,需有机溶剂溶解后才能检测,这不仅使工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且有机溶剂对实验人员也有损害。
①将对数生长期的细胞浓度调整为1~10×104细胞/ml,按103~104个细胞接种于96孔板,每孔100 μl;
②培养细胞24小时后,对其进行不同处理,每个处理设三个平行对照;
③(MTT法)适当培养时间后,取出细胞,倒掉培养液,每孔加入5 mg/ml新鲜配制的MTT溶液,温育4小时,再次倒掉上清液,每孔加入200 ml DMSO,摇匀后,酶标仪检测吸光值。
③(台盼蓝拒染法)适当培养时间后,收集细胞,经台盼蓝染色,在倒置显微镜下计数蓝染及不染色细胞,计算细胞存活率。
应用举例:
1.新药筛选;
2.细胞毒性试验;
3.肿瘤放射敏感性实验。
服务流程:
1.细胞处理;
2.细胞计数;
3.盼兰染色法测细胞活力;
4.MTT法测细胞相对数和相对活力。
注意事项
1、选择适当得细胞接种浓度。
2、避免血清干扰:一般选小于10%的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。
3、设空白对照:与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致,*后比色以空白调零。
MTT实验吸光度*后要在0-0.7之间,超出这个范围就不是直线关系,IC50是半抑制率,意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度,就是IC50。要点:药品2倍稀释,多做梯度.