蛋黄卵磷脂是一种磷脂混合物,主要成分是磷脂酰胆碱(PC),因此其生理作用也以PC的功能为主。蛋黄卵磷脂含氮(N)量应为1.75%~1.95%。蛋黄卵磷脂对热非常敏感,在酸性、碱性和酯酶作用下易水解。对蛋白质、蛋黄过敏者禁用。用于乳化剂、脂质体膜材、食品领域等[1]。据大多数报告,PC能抑制血清甘油三酯和总胆固醇,而提高高密度脂蛋白。本实验参照《中国药典》2020版规定蛋黄卵磷脂用0704氮测定方法进行测定[2]。
原料:鸡蛋黄或鸡蛋粉,样品名称:蛋黄卵磷脂
SKD-1000全自动凯氏定氮仪,SKD-20S2红外石英消化炉,分析天平等
硫酸(分析纯),20g/L 硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,400g/L 氢氧化钠溶液,硫酸铜硫酸钾混合催化剂,0.1mol/L 硫酸标准滴定液。
取0.1g(**至0.1mg)左右的样品,加硫酸铜硫酸钾混合催化剂5g,再加浓硫酸10ml。
空白放相同的催化剂和浓硫酸。
将加完样品和试剂的消化管放置于消化炉上,盖好排废装置,设定红外石英消化炉参数如表 1 所示:
表1 消化炉参数设置
程序段
温度℃
时间min
程序段1
180
5
程序段2
250
程序段3
300
10
程序段4
350
程序段5
400
90
消解完成后,待消化管冷却至室温后取下备用。检查定氮仪各试剂是否充足,同时做仪器空白,待仪器空白稳定后,可将消解好的样品上机测试。定氮仪参数设置如表 2 所示:
表2 定氮仪参数设置
稀释液
碱
蒸馏时间
蒸馏功率
蛋白系数
标准酸
标准酸浓度
样品重量
40ml
45ml
6分钟
100%
1
盐酸
0.05468mol/L
g
实验选取的蛋黄软磷脂样品经消解、蒸馏、滴定,得到实验结果如表 3 所示:
表3 实验结果
样品名称
测量次数
重量g
测量值%
平均值%
示值误差(≤1%)
测量重复性RSD(≤0.5%)
标准值%
硫酸铵
0.05694
21.13209
21.1053
0.2868
0.1461
21.19%±1%
2
0.05674
21.07156
3
0.05371
21.11212
蛋黄软磷脂
4
0.41036
1.79718
1.80395
0.5853
0.3258
1.75-1.95
0.17552
1.80693
6
0.22214
1.80774
本次测试的蛋黄软磷脂氮含量为1.80395%,RSD值为0.3258%,测试结果低于凯氏定氮仪国标要求RSD≤0.5%。示值误差为0.5853%,小于凯氏定氮仪国标要求≤1%,表明该蛋黄软磷脂样品氮含量合格[ PAGEREF _Ref2868 \h 3]。
[1] 关志宇.**制剂辅料与包装材料[J].中国医药科技出版社,2017(01):21.
[2] 《中国药典》(2020版):通则0704.
[3] GBT 33862-2017 全(半)自动凯氏定氮仪[S].
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