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BIO-KONT 20E 革兰氏阴性杆菌鉴定
BIO-KONT 20E 革兰氏阴性杆菌鉴定使用说明书 2.7
【用途】：本试剂盒用于体外标本中**（革兰氏阴性杆菌）的鉴别培养。
【原理】：BIO-KONT20E试验条由20个含有干燥的培养基小孔组成，加入测定的**悬液，培养后，**的代谢作用产生了变化。有的是自然变化，有的是加入测定试剂后表现出来。根据判读结果，通过BIO-KONT鉴定软件检索得到**鉴定结果。
【试剂盒组成】：
① 10或20条鉴定板 ② 10或20张结果记录单。 ③ 操作说明书1份 ④ OX纸条10或20条
【本试剂盒所需显色试剂及配制方法】： ①TDA显色剂：10% FeCl3水溶液。
②IND显色剂：对二甲氨基苯甲醛1g，异戊醇15ml，溶解后，慢慢加入5ml浓盐酸，混匀。
③VPⅠ：5% α-萘酚无水乙醇溶液。 VPⅡ：40% KOH水溶液。
④NO3 A：0.8g对氨基苯磺酸溶于30%醋酸100ml中。NO3 B：0.5gα-萘酚溶于30%醋酸100ml中。
【贮存及效期】：2-8℃贮存，效期见外标签。
【操作】：
1、 取出试验板条，平衡于室温。挑取18-24小时培养的目的菌,做氧化酶试验（OX），并将结果写在记录单上。
2、 取无菌蒸馏水2.5～3ml，挑取18-24小时培养的目的菌,制成菌悬液，使其浊度相当于2号McFarland标准浊度。
3、 将调制好的菌悬液按每孔100ul，加入试验板条中。其中H2S、URE、ADH、LDC、ODC、O孔滴加液体石蜡2滴覆盖。
4、 盖上盖子，放35～37℃孵育20～24小时，取出按判读标准判读自然发生的结果和加入反应试剂后出现的结果（滴加TDA、IND、VP和NO3试剂于相应孔中观察），并记录在记录单上(O孔为ADH、LDC、ODC的对照孔)。
5、 将反应结果输入计算机BIO-KONT 20E软件得到鉴定结果。(糖类结果应尽快判读，否则某些糖易出现假阳性)
6、 BIO-KONT 20E试验条的反应孔排列如下：
ONPG TDA IND VP CIT H2S URE ADH LDC ODC
GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL ARA NO3 0（OX）
7、 结果判读标准如下表：
测　定 底 物 反 应 结 果
阴 性 阳 性
ONPG 对硝基－β－D β－半乳糖甙酶 无色 黄色
－甲基半乳糖
TDA 色氨酸 色氨酸脱氨酶 黄色 深褐色
IND 色氨酸 吲哚产生 无色 粉/红色
VP 丙酮酸盐 3-羟基丁酮产生 无色 粉/红色
乙酰甲基甲醇 (5-10分)
CIT 柠檬酸钠 柠檬酸利用 无色 红色
H2S 硫代硫酸钠 H2S产生 无色或点状黑色 黑色
URE 脲素 脲酶 淡黄 红/橙色
ADH 精氨酸 精氨酸脱羧酶 淡黄 紫红色
LDC 赖氨酸 赖氨酸脱羧酶 淡黄 紫红色
ODC 鸟氨酸 鸟氨酸脱羧酶 淡黄 紫红色
GLU 葡萄糖 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
MAN 甘露醇 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
IN0 肌醇 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
SOR 山梨醇 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
RHA 鼠李糖 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
SAC 蔗糖 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
MEL 密二糖 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
ARA 阿拉伯糖 发酵/氧化 蓝紫色 黄色/灰色
NO3 KNO3 NO3－NO3 黄色 红/粉色
OX 四甲基对苯二胺 细胞色素氧化酶 无色 紫色
【废弃物处理】：使用后的所有的玻璃管、玻璃片、吸头、试条及试验纸条等均须高压**处理。
【质量控制】：为保证试验条的质量试验板条启封后应保持干燥，尽量无菌操作。BIO-KONT20E试剂盒的质量检查可推荐应用以下菌株进行。
1、ATCC 27853 铜绿假单胞菌　 　2、ATCC 13315 普通变形杆菌　　 3、ATCC 700603肺炎克雷伯菌
ONPG TDA IND VP CIT H2S URE ADH LDC ODC GLU MAN IND SOR RHA SAC MELARA NO3 OX
 
ONPG
TDA
IND
VP
CIT
H2S
URE
ADH
LDC
ODC
GLU
MAN
IND
SOR
RHA
SAC
MEL
ARA
NO3
OX
1
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V
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3
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【生产企业许可证】：浙药管械生产许20070018号
【执行标准号】：YZB/浙1918-2008
【产品注册证号】：浙食药监械（准）字2008第2400244号
【说明书批准及修改日期】：2008年11月18日
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