【用途】:
本试剂盒用于体外标本中**(非发酵菌)的鉴别培养。
【原理】:
Rap·N-15试条由15个干燥生化培养基组成,在小孔中加入**悬液,经37℃温箱孵育。在**代谢作用下直接产生颜色变化或经加入显色剂后产生颜色变化。将反应结果按照说明进行判读,通过BIO-KONT鉴定软件检索得到**鉴定结果。
【试剂盒的组成和保存】:本试剂盒2-8℃贮存,组成如下:
Rap·N-15试验条10或20条,效期见外标签 10或20片
Rap·N-15编码组合记录卡10或20张 Rap·N-15说明书1份。
【部分显色试剂配制方法如下】:
1、IND显色剂:对二甲氨基苯甲醛1g,异戊醇15ml,溶解后,慢慢加入5ml浓盐酸,混匀。
2、NO3显色剂:I液:二甲基-α-奈胺0.5g,30%醋酸80ml,徐徐加热溶解,脱脂棉过滤,棕色瓶保存。II液:对氨基苯磺酸0.8g,30%醋酸100ml。
【使用说明】:
1、 菌悬液的制备:取无菌蒸馏水2-3ml,挑取培养24小时以内的单个菌落或纯菌苔加入管中,充分研匀混合。制备好的菌悬液浓度应
达到2号McFarland标准浊度。
2、 试剂条的接种:将调制好的菌悬液用加样器(配无菌加样枪头)按每孔100微升加入生化试条中,其中A组的①、②、③、④、⑦、
孔和B组的⑥孔需加2滴液体石蜡覆盖,接种后放置35-37℃孵育18-24小时。
3、 判读结果:取出孵育好的试条,部分反应孔需加试剂显色,建议按以下次序进行:
NO3测定:先后加NO3Ⅰ、Ⅱ液各一滴,结果:红(+),不变(-)。
IND测定:加IND显色剂一滴,红、粉红色(+),不变(-)。
OX氧化酶测定:用OX滤纸条从分离物平板上粘**1分钟内变紫(+),不变(-)。
ADH、LDC、ODC的判读,应与对照管相比较,紫红色为(+),与对照管一致为(-)。
4、 将反应结果输入计算机BIO-KONT软件得到鉴定结果。(糖类结果应尽快判读,否则某些糖易出现假阳性)
1组 试 验 | 结 果 | | 2组 试验 | 结 果 | |
代号 | 反应项目 | 阳性 | 阴性 | 代号 | 反应项目 | 阳性 | 阴性 |
ADH | 精氨酸.双水解酶 | 紫红 | 不变 | IND | 吲哚产生 | 红、粉红 | 不变 |
ODC(DOC) | 鸟氨酸脱羧酶 | 紫红 | 不变 | ONPG | β-半乳糖苷酶 | 黄色 | 无色 |
LDC | 赖氨酸脱羧酶 | 紫红 | 不变 | SAC | 蔗糖产酸 | 黄色/灰色 | 蓝紫色 |
O | 氨基酸对照 | - | - | MAL | 麦芽糖产酸 | 黄色/灰色 | 蓝紫色 | |
CIT | 柠檬酸钠 | 红色 | 无色 | XYL | 木糖产酸 | 黄色/灰色 | 蓝紫色 | |
NO3 | 硝酸盐还原 | 棕红 | 不变 | H2S | 硫化氢产生 | 黑色 | 不变或点状黑色 | |
URE | 脲酶产生 | 红、粉红 | 不变 | GLU(GLD) | 葡萄糖产酸 | 黄色/灰色 | 蓝紫色 | |
ESC | 七叶素产生 | 黑、棕黑 | 不变 | OX | 氧化酶 | 紫色 | 无色 | |
5、 废弃物的处理:使用后的所有玻管、玻片、吸头、试验条及试验用的纸片等均需要高压**。
【质量控制】:为保证试条、接种液的质量,建议:
1、试条启封后保持干燥,不受潮。
2、Rap·N-15试剂盒的质量检查推荐应用以下菌株进行,所得结果如下:
菌 名 | ADH | ODC(DOC) | LDC | CIT | NO3 | URE | ESC | IND | ONPG | SAC | MAL | XYL | H2S | GLU(GLD) | OX |
绿脓假单胞�� | + | - | - | + | + | + | - | - | - | - | - | + | - | v | + |
粪产碱杆菌 | - | - | - | + | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | + |
多食黄杆菌 | + | - | - | - | - | + | + | - | - | + | + | + | - | - | + |
【生产企业许可证】:浙药管械生产许20070018号
【执行标准号】:YZB/浙1918-2008
【产品注册证号】:浙食药监械(准)字2008第2400244号
【说明书批准及修改日期】:2009年02月25日