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高效液相色谱仪的系统组成、工作原理

 高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。与经典液相柱色谱装置比较 高效液相色谱,具有高效、快速、灵敏等特点,高效液相色谱以经典的液相色谱为基础,是以高压下的液体为流动相的色谱过程。高效液相色谱分析的流程如下:
高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。高压泵将储液器中的流动相打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,溶解于流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,因为样品溶液中的各组分在固定相和流动相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。遇到复杂的混合物分离(极性范围比较宽)还可用梯度控制器作梯度洗脱。
高效液相色谱的分离过程 HPLC,它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。
与经典的液相色谱相比,具有高效液相所用的固定相粒度小(5um-10um)、传质快、柱效高的优势。近年来,在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定。
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