您好,欢迎来到仪表展览网!
请登录
免费注册
分享
微信
新浪微博
人人网
QQ空间
开心网
豆瓣
会员服务
进取版
标准版
尊贵版
|
设为首页
|
收藏
|
导航
|
帮助
|
移动端
|
官方微信扫一扫
微信扫一扫
收获行业前沿信息
产品
资讯
请输入产品名称
噪声分析仪
纺织检测仪器
Toc分析仪
PT-303红外测温仪
转矩测试仪
继电保护试验仪
定氮仪
首页
产品
专题
品牌
资料
展会
成功案例
网上展会
词多 效果好 就选易搜宝!
上海市金鹏分析仪器有限公司
新增产品
|
公司简介
注册时间:
2009-01-06
联系人:
电话:
Email:
首页
公司简介
产品目录
公司新闻
技术文章
资料下载
成功案例
人才招聘
荣誉证书
联系我们
产品目录
凝胶成像分析系统2018款
紫外分析仪2018款
核酸蛋白检测仪2018款
紫外检测仪2018款
自动部份收集器2018款
恒流泵蠕动泵2018款
微量核酸检测仪
梯度混合器2018款
记录仪采集器2018款
层析柱2018款
液相色谱分离层析仪2018款
光化学反应仪2018款
旋涡混合器2018款
蓝光透射仪(切胶仪)2018款
荧光增白剂检测仪2018款
蓝光切胶仪
紫外凝胶电泳
光化学反应仪
凝胶成像分析系统
自动液相色谱分离层析仪
核酸蛋白检测仪
紫外检测仪
紫外分析仪
自动部份收集器
恒流泵
梯度混合器
PCR基因扩增仪
超声波/离心机
其他离心机
低速离心机
台式离心机
高速冷冻离心机
超声波清洗
超声波破碎
电泳仪(电泳槽)2018款
反应仪器
渗透压
制冰机
漩涡混合器
研磨机/分散机
液氮罐
脱色摇床
摇床/振荡
搅拌匀质
磁力搅拌器
电动搅拌器
当前位置:
首页
>>>
技术文章
>
技术文章
纯化产品的冷冻干燥保存
纯化产品的冷冻干燥保存
一、冷冻干燥的原理、优点
冷冻干燥就是把含有大量水份物质预先冻结成固体,然后在真空条件下适当加热使水蒸气直接从固体中升华出来,而物质本身留在冻结时的冰架子中,因此干燥后的产品体积几乎不变。整个干燥是在较低的温度下进行的。
冷冻干燥的优点:
1.低温冷冻干燥对许多热敏性物质特别使用。如蛋白质、微生物等不会发生变性或失活,广泛的应用于医药工业。
2.低温冷冻干燥时,产品挥发性成份损失小,因而应用于食品、药品和化工产品等。
3.低温冷冻干燥过程中,可以有效抑制微生物的生长和酶的作用。
4.低温冷冻干燥基本保证了产品的原有的结构,不会发生浓缩现象。
5.干燥后的产品疏松多孔呈海绵状,加水后溶解,可迅速恢复原来的形状。
6.真空干燥时基本不含氧气,因此一些易氧化的物质得到保护。
7.低温冷冻干燥可排除95%以上的水份,干燥后的产品能长期保存不变质。
二、冷冻干燥的操作程序
1、准备工作
产品共熔点的测定:水溶液的冰点会低于溶媒的冰点(详细原理请见物理化学),冷却溶媒液开始析出晶体的温度称为冰点,全部凝结的温度叫做溶液的凝固点。反之,加热凝固的溶媒时,凝固点就是溶化的开始点,所以凝固点又叫共熔点。测定共熔点的必要性:一方面,由于冷冻干燥是在真空状态下进行,所以要求含有产品的溶媒液全部冻结后方可在真空下进行升华,否则未冻结的部分液体会在真空下迅速蒸发,造成溶媒的浓缩而使干产品的体积缩小,而且溶解在水中的气体在真空下迅速冒出来,使冻干产品冒泡,甚至被带出瓶外。为此冻结的溶媒在升华开始时必须冷却到共熔点以下的温度,才能使干产品真正冻结。另一方面,低温加热升华时不得超过共熔点的温度,否则产品发生溶化,干燥后的产品将发生体积缩小,出现气泡,颜色加深,溶解困难等现象。因此,可以说共熔点的测定是实验成败的关键。实验室常用测共熔点的方法有惠斯顿电桥法、临界电阻法、差式热分析法和低温显微镜直接观察法。
2、产品的预冻
a、需冻干的产品要配制成一定浓度的液体,一般在4~25%为宜。
b、产品的分装:散装和瓶装。散装可采用金属盘、饭盒或玻璃器皿;瓶装采用玻璃瓶(如:血浆瓶、疫苗瓶和青霉素小瓶等)和安瓶(如平底安瓶、长安瓶和园安瓶等),各容器在分装之前要求清洗干净并进行**处理。产品的分装的要求:一般厚度不大于15cm,表面积尽可能大,这样有利于升华。
c、预冻的方法:1、箱内预冻法:直接把产品放置在冻干机冻干箱内的多层隔板上进行冷冻;2、箱外预冻法:一种方法是低温冰箱或酒精加干冰来进行预冻。另一种方法是专用的旋冻器,可把大瓶的产品边旋转边冷冻成壳状结构再进冻干箱;3、特殊预冻法,离心式预冻法,利用在真空下液体迅速蒸发,吸收本身的热量而冻结,一般800转/min。
d、预冻时要注意的问题:1、预冻速率,应根据产品选择优速率;2、预冻的低温度,应低于共熔点温度;3、预冻时间,应恰好在抽真空之前(因此要提前使冷凝器工作,达到-40℃时,真空度达到100μHg)溶媒均已冻实(经验值:一般预冻达到规定的温度后,再保存1-2h就可以抽真空升华)。
3、产品阶段的干燥
升华干燥阶段加热的温度应接近于共熔点的温度,但又不能超过共熔点的温度。
阶段使溶媒内冻结冰大部分升华,因此也称该过程为升华干燥阶段。升华是一个吸热的过程,因此必须对产品低温加热,但绝不能超过共熔点的温度。如果加热的温度低于共熔点的温度过多,则升华的速率降低而延长了升华阶段的时间。
影响升华干燥阶段的因素:1、产品的本身,共熔点较高的产品易干燥,升华时间短;2、产品的分装厚度,正常的升华速率大约每小时产品下降1mm的厚度;3、冻干机本身的性能,真空性能、冷凝器的温度和效能。
4、维持阶段
使得冻干箱加热隔板的温度接近于产品共熔点的温度,维持12h左右,使产品中大部分动结冰升华。(实验室常用的方法即处理,因此实验前要预计实验进程)
5、产品**阶段的干燥
一旦产品内冻结的冰大部分(约90%冰已升华)升华完毕,产品的干燥进入**阶段,即解吸干燥阶段。
解吸干燥阶段,可以迅速使产品产品的温度上升到该产品的高容许温度(25~40℃),并在该温度下一直维持到冻干结束。
6、后维持阶段即冻干结束
怎样判断冻干结束?产品的温度达到高许可的温度,并在这个温度保存2h以上。冻干结束后,要把产品放入无菌干燥箱,然后尽快加塞封口,以防止重新吸收空气的水份。
三、冻干曲线的制作和时序的制定
生物制品的冷冻干燥产品常需要一定的物理形态,如均匀的颜色、符合要求的含水量、良好的溶解性、高的存活率和较长的保存期。因此要优化各干燥步骤的参数,冻干曲线和时序就是进行冷冻干燥过程控制的基本依据。
冻干曲线是冻干箱隔板层的温度(干燥中产品温度受隔板层温度控制)和时间的关系曲线。冻干时序是在冻干过程中,各设备起闭运行的情况。
制定冻干曲线和时间需要确定下列数据:
A.预冻速率
实验室常用预冻温度和装箱时间来决定预冻速率。要求预冻速率快,则冻干箱先降至较低温度,然后再装箱;要求预冻速率慢,则产品装箱之后再让冻干箱降温。
B.预冻的低温度:预冻低温度低于产品共熔点的温度。
C.预冻时间
一般要求在样品温度到达**温度之后再保持1~2h。注意:一般不赞成直接把溶媒直接放在冷冻箱的隔板层上干燥。
D.冷凝器降温的时间
要求在预冻结束抽真空的时候,冷凝器的温度要到达-40℃以下。冷凝器的降温通常从开始一直持续到冻干结束为止,温度始终应在-40℃以下。
E.预冻结束时间
预冻结束就是停止冻干箱隔板层的降温,通常在抽真空时(或真空度达到一定值时)停止隔板层的降温。
F.抽真空时间
预冻结束即开始抽真空,直至干燥结束
G.真空控制时间
真空控制目的是为了改进冻干箱的热量传递,通常在**阶段干燥时使用,待产品温度达到高许可温度后停止使用,继续恢复高真空状态。
H.产品加热的高许可温度
升华过程中,加热温度可以略超过产品的高许可温度,但在后阶段隔板层温度应与产品高许可温度一致。
G.冻干的时间:18~24h
上一篇:
磁力搅拌器原理及使用
下一篇:
PCR扩增产物鉴定与纯化实验原理及实验过程
若网站内容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除