核酸蛋白检测仪资料详解:
一、检测原理
所有紫外吸收检测器工作原理都是基于光的吸收定律 --- 朗伯 - 比耳定律。该定律指出,当一束单色光 ( λ ) 辐射通过稀浓度物质溶液时,如果溶剂不吸收光,则液体的吸光度与吸光物质的浓度和光经过溶液的距离成正比。其关系式为:
A( λ )=a( λ )bc
A=-LgT=Lg1/T
二、层析装置分类:
按描谱方式分有:记录仪描谱和电脑描谱 ( 外加采集分析器 )
按检测波长分有:单波长检测和双波长 ( 多波长 ) 同步检测
按检验器分有:核酸蛋白检测和核酸蛋白检测、电导检测联用
三 . 传统检测仪:
传统层析实验装置由单波长核酸蛋白检测仪 ( 外加电脑采集器或将电脑采集器装入检测仪中也属此类 ) 、层析柱、恒流泵、部分收集器和记录仪等部件构成。 数显超声波测厚仪 用一种波长 ( 如 280nm 或 254nm 等 ) 下对已知物质 ( 蛋白或核酸等 ) 进行实验检测,高校实验室的层析实验装置大多属于此类。特点如下:
1 、检测前必须选定一种波长 (280nm 、 254nm) 进行检测,利用物质特征波长分离已知组分。
2 、要求学生在检测前一定要先调整透过率为 ,然后再调整吸光度为 0 。学生经常会问:虽然透过率和吸光度在此点 (T= , A=0) 符合了 A=lg(1/T) 关系,但怎样保证在测量范围内都符合朗伯 -- 比尔定律 ?
3 、传统检测仪为保证测量读数落在仪器有效测量范围内,在仪器面板上都设有灵敏度选择装置 ( 2.0A 、 1.0A 、 0.5A 、 0.2A 、 0.1A 、 0.05A 等 ) 。因此,测量前要选择合适的灵敏度 ; ②真正吸光度值是仪器显示数与灵敏度的乘积 ; ③测量中不要改变灵敏度, 数显超声波测厚仪 否则可能会带来基线变化。
4 、传统检测仪在不同灵敏下的测量结果均为 0-10mv 直流信号,将此信号输出到记录仪或电脑采集器。显然,记录纸或电脑屏上的吸光度也并非样品实际的吸光度,也应受到仪器灵敏度的调制。
四、新型检测仪
以对蛋白、核酸、肽等生物大分子物质的检测、分离和纯化为目的,新型层析实验系统中的电脑核酸蛋白检测系统具有以下特点:
1 、系统智能调整吸光度到 0.000 ,透光率到 。,并在测量范围内的吸光度和透过率严格符合 A=Lg(1/T) 。
2 、单波长检测或双波长同步检测。
3 、系统自带数据采集工作站,检测、采集、软件工作站一体化系统集成。分析软件具有实时描谱、分析参数、图谱保存、图谱打印、图谱编辑等功能,峰高、峰宽、峰面积、归一化、保留时间、半峰宽、峰底宽、面积含量、纯度、层析柱分辩率等参数。
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