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浅析色谱柱的几个容量

色谱柱体积：即色谱柱管的容积，Ｖ＝3.14*r²*L。以250*4.6mm的色谱柱为例，柱体积约为4.2ml，冲洗15倍体积约为60ml，即以1.0ml/min的流速，要冲洗60分钟。

容量因子：又称容量比或分配比,是在一定温度和压力下,组分在两相间分配达到平衡时的质量比。

色谱柱容量：是指色谱柱对一种溶质可容纳的*大量值，一旦超过此数值，该溶质的色谱峰就会发生畸变，也就是说常说的超载。超载的色谱峰并不均衡，而且沿固定方向变化，一般我们称之为“鲨鳍”峰。色谱柱超载常表现为色谱峰的严重拖尾，不过这种情况对色谱柱本身没有什么影响。在水月大姐的回复中提到：“在样品量增加到一定程度以后,柱效率迅速下降。能引起柱效率下降10%的样品量称之为柱容量。”柱容量与固定相的极性、填料的粒径，柱内径和溶质的保留度等有关。如果色谱柱对一种溶质的容量很高，则表明该溶质与固定相的极性很相似（相似相溶），例如，一根极性柱对极性化合物的容量一定大于对非极性化合物的容量。粒径和内径大的色谱柱，其相对柱容量也会较高，如制备型色谱柱，从分离的角度看，特别是制备纯物质的色谱分离，柱容量要大，这就需增加填充物和加大柱的内径，但柱径加大，进样量增加，柱的分离效率就会下降，势必要相应地增加柱长度，因而减慢分离速度，这是一对矛盾。故在实际工作中，常常要求在柱容量、柱效率和分析速度之间选择一个*佳的操作条件。

   溶质的保留度增加会使柱容量降低，如果两种溶质极性类似，则后出峰的化合物更容易发生超载现象。

   柱容量与固定相类型也有很大关系。表面多孔型固定相颗粒较大，多孔层厚度小，孔浅，相对死体积小，出峰迅速，柱效高，渗透性好；由于孔浅，梯度淋洗时，当流动相成分改变后．孔内外流动相成分能迅速达到平衡，机械强度高，装柱容易，其不足的是由于多孔层厚度小，因而柱容量小，*大允许样品量受到限制，适用于比较简单的样品分析及快速分析。

   全多孔型固定相，由于颗粒很细，孔仍然很浅．传质速度较快，柱效高。梯度淋洗时孔内外流动相成分的平衡速度仍然较快．其*大特点是柱容量大，*大允许样品量是表面多孔型的5倍，但装填时的渗透性低，因而需要更高的操作压力．制柱比表面多孔型的难。这种固定相特别有利于痕量组分及多组分复杂混合物的分离分析。

   色谱柱超载时，要减少进样量或稀释样品或使用高容量的色谱柱。

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