那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于蛋白质纯化方法经典攻略(四):
图 10. 蛋白质纯化工艺中收集的蛋白质样品的SDS-PAGE检测结果。
2、光谱分析 - 一种分析蛋白质光学性质的方法。这种用于蛋白质纯度分析的方法只适用于如细胞色素P450等具有独特光学特征的蛋白质。这一类蛋白质在某特定波长(420 nm附近 [40] )有吸收而其他蛋白质没有,因此比较它在420nm和280nm处 (该波长处所有蛋白质均有吸收) 的吸收,即可获得该蛋白质的纯度信息。这个方法快速且可大规模操作,但仅使用于部分蛋白质。 3、蛋白质测活 - 一种目标蛋白的酶活实验。这种测定蛋白质纯度的方法通常与其他蛋白质浓度测定方法相结合以计算其相对整体蛋白质浓度的活性。活性测试只适用于活性可以被高通量方法如酶解测活的蛋白质。对某些蛋白质而言,活性测试提供了一种快速可靠的蛋白质检测方法。酶的测活是非常有用的,因为这样在下一步应用前即可先将失活的蛋白质排除出去。
无论是蛋白研究还是应用,通常需要将蛋白利用不同的生���系统表达出来,然后进行分离和纯化。研究实验室通常需要纯化微克或毫克级别的蛋白质,而工业上需要纯化数千克甚至数吨的蛋白质。因此,蛋白纯化非常重要。纯化过程中,主要需要考虑宿主污染、样品的可溶性、蛋白结构的完整性和生物活性。分享了以上蛋白纯化的方法,希望对大家工作有所帮助。