那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下蛋白质纯化系统方法经典攻略(一):
不迷路
Tris 25°C的pKa值是8.06,表示当pH=8.06,50%的Tris是质子化(酸式结构),50%是去质子化(碱式结构)。 关于缓冲液的一个常规原则是,其pH值应保证在pKa值左右1个pH值单位范围内,从而保证其具有良好的缓冲能力。如此可以保证同时有足够的以酸式结构和碱式结构存在的分子在加入 H+ 或者 OH- 时可以将它们中和。这样,缓冲液就可以防止pH变化导致的蛋白质稳定性改变。
1、水溶性
2、化学稳定性
3、在所需pH范围内良好的缓冲能力
4、与分析和实验应用条件具有良好的兼容性
5、与其他溶质具有良好的兼容性
很多物质都可以用于生物缓冲液。*常使用的缓冲液成分通常具有接近中性的pKa值,可在生理pH值范围左右使用。表1列出了4种*常用的生物缓冲液、各自的pH值应用范围及各自可能对蛋白质纯化过程产生影响的优缺点。为保证足够的缓冲能力,这些缓冲液的浓度通常为25mM。
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