OLYMPUS BX51研究级正置荧光显微镜
实验室原有的Leitz、OPTON们早已老骥伏枥,虽有壮志,却再也难以满足现实需要,购买新机迫在眉睫。
买显微镜就像配电脑,确定配置一是要根据需要,二是要看口袋里的银子。我们实验室做植物,主要涉及荧光、石蜡切片和活体观察,植物活体组织观察当然也会涉及。这样,荧光组件是必备的。蓝色激发模块选择窄带Band Pass,因为可以滤掉叶绿体的红色自发荧光;另外还选择了UV和绿色激发块。而选择难点在于物镜。开始打算配DIC和半复消色差物镜,可算下来超出过预算;而去掉DIC,预算又有剩余。既然DIC要不了,物镜我就要*好的吧!至于100×物镜的缺失,只能说是经验不足留下的遗憾――如果上天再给一次机会,无论如何也要配全的。至于电动,基本是不需要的了――我们不做细胞培养,更不打算升级成共聚焦,再说,银子也不够使。至于电脑,主流CPU、独立显卡,大内存,主流的显示器即可。经过艰苦的学习、比较、讨价还价和漫长的等待,终于迎来了今天的主角:研究级正置荧光显微镜OLYMPUS BX51。
OLYMPUS BX51 是世界四大显微镜生产商之一的OLYMPUS(简称O记)21世纪推出的研究级别主力型号。黑白搭配是现在显微镜的流行色,没啥好说的。整个机身呈Y字形,即能保证足够的稳定性,又能使底座前出部分不占用过多空间(想想早期Leitz DIAPLAN、Zeiss Photo系列、还有O记Vanox/BH2们的巨大底座吧)。后部竖直机身内可以容纳相应的电路板等部件,Y字的后部空间恰好可以容纳汞灯和卤素灯两个灯室。机身上的横梁是荧光光路和荧光模块;*上方则是三目头和巨大的CCD。整个白色机身包围的是显微镜的黑色核心部件:物镜、聚光镜,中间则是载物台。BX51给人整体的感觉是稳重、现代,而不失美感,很不错的设计!
物镜历来是显微镜的核心。这套UPlanSAPO物镜为原来无限远光学系统UIS的升级版――UIS2的核心部件,是O记现在的**产品(单位公用的共聚焦FV1000同样配置此系列物镜,^_^),在材质、UV/IR端的荧光通过率、色差矫正等多方面做出改进,使其在不同波段的成像质量得到提高。黑色的表面处理也给人很特别的感觉。仔细比较可以发现,经过多年的积累O记产品的很多重要参数(如NA.)已经非常接近德系的了。看看40×的干物镜,NA.值为0.95,快达到理论极限了(空气折射率为1,干物镜NA.值不可能超过1)。同时其价格反倒相对亲民,该系列40×物镜报价一千多美金,这在德系镜子里是不敢想的。
OLYMPUS BX51数码技术的发展为显微成像带来极大便利,CCD现在已然成为显微镜的核心部件。荧光成像方面当然黑白CCD是*佳选择,但由于实验需求的多样性,*终还是选择了DP71冷CCD。用过早一点显微镜的人可能会有这样的烦恼:CCD打开一段时间后,过热指示灯会闪个不停。这就是非制冷CCD的烦恼,不能连续开机太长时间。DP71可以实现低于室温10℃的制冷,因此长时间开机也没有问题。DP71采用2/3英寸145万像素彩色CCD芯片,通过位移可在3秒内实现1250万像素成像,并可实现15fps的动态图像采集。可选的控制软件有两类:一类是免费的DP-BSW和IPE, 另外是收费的IPP。DP-BSW界面简单友好,操作简单,IPP和IPE功能强大,但操作稍显复杂。
OLYMPUS BX51 采用经典的“上荧下卤”的构造――在进入物镜之前,上部是荧光光路,下部是明场光路。荧光光源采用传统的汞灯,虽然有寿命短的缺点,但价格上的优势加上足够大的功率(100W),性价比还是很高。荧光光路中间有两个中性滤光片可用来改变荧光强度。前面板可以看到荧光模块的荧光标签,对应的转盘*多可以同时安装五个荧光模块。荧光成像方面,采用UIS2光学系统的BX51表现优良。由于UIS2在UV到IR端的透过率有很好的优化,所以在UV激发波段可以得到很好的成像效果。采用Band Pass的蓝色激发块观察GFP信号时也能很好控制干扰信号。例图可以看出荧光效果。
明场照明由机身后下方的100W卤素灯提供,可以保证足够的亮度。底座光路可调部分为内置式的滤光片组合、电压调节钮和视场光阑。滤光片基本内置,并通过底部右侧并排伸出的四个按钮控制,分别是LBD日光型滤光片、ND25、ND6及一个备选按钮。内置的设计极大方便了用户的使用,也是当代**显微镜的一大特征。侧前的旋钮可以通过改变电压调节照明亮度,很方便。聚光镜配置了简单的摇出式,可保证科勒照明的实现。此外笔者摸索出一种类似于体式镜的“斜射照明”法,可以得到出色的观察效果。
用的久了,配件不足的矛盾日渐明显,而这时实验室经费也充足,升级装备恰逢其时。把需要的DIC、100×油镜、低倍物镜、暗场环等都添上(见升级配置单)。看上去很简单,把缺的配件补上即可。但操作却很麻烦。因为涉及到外贸、免税,这是由单位专人负责,我们所做的只有漫长的等待。
长久以来,O记的镜子给人以物美价廉的感受,看来确实如此。当然,O记的镜子不是没有缺点。一是大量使用塑料件:目镜、荧光滤片、灯箱等部件塑料的使用诚然降低了成本,但塑料感太严重,没有德系镜子厚重扎实的感觉。二是做工稍显粗糙:一些金属件的棱角处理粗糙,表面镀漆略显松散、不够致密。另外有些设计似不太合理,像压片夹设计过厚,这造成高倍观察载玻片边缘标本时易损伤物镜。