微生物生长繁殖的控制（一）温度 1、高温**（**）法——是*常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。 ★干热**法（dry heat sterilization） §焚烧法（incineration）：是将被**物品在火焰中燃烧，使所有的生物质碳化。简单、彻底，但对被**物品的破坏极大。适用于无经济价值的物品**，及不怕烧的实验器具，如接种环、镊子、试管或三角瓶口的**等。 §干燥热空气**法(hot-air oven)：将物品放入烘箱内，然后升温至150℃—170 ℃ ，维持1—2小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品的**，不适合液体样品，及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的**。 特点：由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死，所以温度高、时间长。 ★湿热法(moist heat sterilization) ： 特点：温度低、时间短、**效果高 原因： 1) 菌体内含水量越高，则凝固温度越低； 2) 蒸汽冷凝会放出潜热； 3) 饱和水蒸汽穿透力强； 4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，主要破坏氢键结构。 高压蒸汽**法 利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 ℃以上高温**的方法。 方法：121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）维持15-20min。 112℃（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）20-30min。 115℃（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）20-30min。 应根据**物品的性质或成分选择**温度 例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用121 ℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 ℃。 适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。 高温对培养基的不利影响： ▲会产生混浊或形成不溶性沉淀 ▲营养成分被破坏（ PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用）； ▲色泽加深（褐变如产生氨基糖等）； ▲改变培养基的pH值（通常下降0.2） ； ▲形成有害物质，抑制微生物生长； 消除有害影响的措施 采用特殊的加热**法 过滤**法 加入螯合剂 2、低温抑菌低温——低温是通过降低酶反应速度使微生物生长受到抑制。 冷藏法：5℃，微生物斜面菌种放置冷藏箱中可保存数周至数月而不衰竭死亡；食品保鲜 冷冻法：食品工业中采用-10℃左右的冷冻温度较长时间地保藏食品；冷冻法也可用作菌种保藏，但所需温度更低，如-80℃低温冰箱、或-78℃干冰、或-80℃液氮中冷冻保存。 （二）过滤**法采用滤孔比细菌还小的筛子或滤膜作成各种过滤器，当空气或液体流经筛子或滤膜时，微生物不能通过滤孔而被阻留在一侧，从而达到**的目的。但不能除去病毒。 实验室中常用的滤器： 滤膜过滤器、蔡氏过滤器、玻璃过滤器、磁土过滤器等。 过滤介质：醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、聚丙烯膜； 以及石棉板、烧结陶瓷、烧结玻璃等。 滤器孔径：常用0.22 μm 、0.45 μm 。 应用：对于含酶、血清、维生素和氨基酸等热敏物质**。 （三）辐射 紫外线** 使用紫外灯照射，可以根据1W/M3来计算剂量，若以面积计算，一般30W的紫外灯可用于15M2的房间**，照射时间为20—30分钟，有效照射距离为1米左右。 γ射线** Co60放射性元素可放出γ射线。 **剂量：20—50KGY