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高压蒸汽**
实验原理
高压蒸汽**是将待**的物品放在一个密闭的加压**锅内,通过加热,使**锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸汽不能溢出,而增加了**器内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到**的目的。
在同一温度下,湿热的**效力比干热大,其原因有三:一是湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低(表Ⅵ-2),二是湿热的穿透力比干热大;三是湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ(千焦)的热量。这种潜热,能迅速提高被**物体的温度,从而增加**效力。
一般培养基用1.05kg /cm2,121.3℃15—30分钟可达到彻底**的目的。**的温度及维持的时间随**物品的性质和容量等具体情况而有所改变。例如含糖培养基用0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃**15分钟,但为了保证效果,可将其他成分先行121.3℃,20分钟**,然后以无菌操作手续加入**的糖溶液。又如盛于试管内的培养基以1.05kg/cm2,121.3℃**20分钟即可,而盛于大瓶内的培养基*好以1.05kg/cm2**30分钟。
实验室中常用的高压蒸汽**锅有立式、卧式和手提式等几种。本实验介绍手提式高压蒸汽**锅的使用方法。
实验试剂
牛肉膏蛋白胨培养基
实验设备
手提式高压蒸汽菌锅等
实验材料
培养皿(6套一包)
实验步骤
1.首先将内层**桶取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
2.放回**桶,并装入待**物品。注意不要装得太挤,以免防碍蒸汽流通而影响**效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
3.加盖,并将盖上的排气软管插入内层**桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。
4.用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。本实验用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分钟**。
5.**所需时间到后,切断电源或关闭煤气,让**锅内温度自然下降,当压力表的压力降至0时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出**物品。如果压力未降到0时,打开排气阀,就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染。
6.将取出的**培养基放入 37℃温箱培养24小时,经检查若无杂菌生长,即可待用。
注意事项
检查培养基**是否彻底。
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