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生物胺检测方法
1 引言
生物胺是一类含氮的低分子量有机化合物的总称。根据结构可以把生物胺分成3类:脂肪族:腐胺、尸胺、精胺、亚精胺等;芳香族:酪胺、苯乙胺等;杂环族:组胺、色胺等。
1.1 生理作用
各种动植物的组织中都含有少量的生物胺,也普遍存在于多种食品和酒、饮料中。生物胺不仅是生成***、核酸、蛋白质的前体,也是生成致癌物质的前体。少量的生物胺对人体有益,如儿茶胺、和组胺等能调节神经活动,控制血压;苯乙胺和酪胺有升压作用。过量摄入则会引起中毒。
1.2 生物胺引起的食品**和水产品出口问题
生物胺中组胺对人类的健康的影响*大,其次是酪胺。摄入8~40mg组胺产生轻微中毒症状,超过40mg产生中等中毒症状,超过100mg产生严重中毒症状。酪胺超过lOOmg会引起偏**。当食品中生物胺含量达到1000mg•kg-1时会对人体健康造成极大的危害。除了组胺、酪胺本身的作用外,其他生物胺的存在会增强组胺和酪胺的**作用。因此,很难确定一个标准来衡量生物胺的毒性。美国FDA通过对爆发组胺中毒的大量数据的研究,确定食品中组胺的危害作用水平为:500mg•kg-1;欧盟规定鲭科鱼类中组胺含量不得超过100mg•kg-1,其他食品中组胺不得超过100mg•kg-1,酪胺不得超过100~800mg•kg-1;我国规定鲐鱼中组胺不得超过1000mg•kg-1,其他海水鱼不得超过300mg•kg-1[1]。我国水产品出口企业如没有重视生物胺的检测,出口产品易遭罚没,而造成严重的经济损失。
2 生物胺检测方法
胺的分析方法包括HPLC、TLC和酶联**分析等。组胺等生物胺含有-NH2能形成氢键,所以常用的方法是HPLC-FLD、HPLC-UV。国内没有同时测定多种生物胺(8种以上)的检测方法。
2.1 国内文献有关生物胺的测定方法 [2]
采用高效液相色谱法,以1,6-己二胺为内标,测定柿子中的精胺、亚精胺、尸胺和腐胺。样品经丹磺酰氯衍生,硅胶柱净化,LichrosorbNH2柱(5µm,200mm×4.0mm)分离后,以氯仿:乙酸乙酯:三乙胺(98.4:1.5:0.1)为流动相,流速为1.5mL•min-1,荧光检测器检测。激发波长为336nm,发射波长为495nm,精胺、亚精胺、尸胺和腐胺的线性相关系数均大于0.99,其回收率分别为98.99%、94.02%、96.46%和105.44%。生物胺定量检测限1—5mg•kg-1
2.2 国外文献有关生物胺的测定方法
2.2.1 7-氟-4-硝基苯并二唑柱前衍生/毛细液相色谱-串联质谱法测定生物胺[3]
用7-氟-4-硝基苯并二唑(NBD)柱前衍生/毛细液相色谱-串联质谱法测定生物胺。生物胺包括色胺、组胺和胍丁胺,进行衍生反应后,在毛细柱(20m*0.25mmC85μm)上分离,选择电喷雾离子化,碰撞诱导解离(CID)得到特征的子离子。胍丁胺是一种潜在的神经递质。胍丁胺的检测限为0.6ng•ml-1(信噪比=3),在15-1000ng•ml-1浓度范围内,线性相关系数为0.9997。
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