QB/T2492-2000低聚木糖检测方法
1低聚木糖的测定(高效液相色谱法)
本方法适用于添加低聚糖的保健食品中低聚塘的检测.
1. 1方法提要
低聚糖各组分用高效液相色谱法分离井定量测定。以乙睛、水作流动相在碳水化合物分析柱上糖的分离顺序是先单糖后双糖,先低聚后多聚,以示差折射检测器检测。由T于本产品为>95%的低聚木塘纯品,故可用面积比值法求出样品中低聚搪含量。
1. 2仪器
(1)高效液相色谱仪:Waters HPLC 515泵,410示差折光射检测器,色谱工作作站。
(2)超声波振荡器。
(3)微孔过湾器(滤膜0. 45um)
1. 3试剂
(1)乙腑(色谱纯)
(2)水(三蒸水并经Milli-Q超纯处理)
(3) D一木搪(D-xylose)C5H1005上海市化学试剂公司分装(E. Merck分装):定位用.。因Sigma公司无低聚木糖的样品。
1. 4测定步骤
(1)样品处理
用精度0. 0001g的分析大平准确称取胶囊内容物约1.0g,于100ml的容器中.加水约80m1于超声波振荡器中振荡提取15分钟,加水至刻度,摇匀,用0.45um滤膜过滤后直接进样测定。
(2)色谱分离条件:
色谱柱:SUGAR PAK I 6.5MMX300MM COL,SUGAR-PAK INSERTS 10/PK,GUARD-PAK HOLDER
流动相:乙腈+水(85+15)
流速:0.8m1/min
检侧器灵敏度:4
进样*:20uL
(3)样品测定:
取样品处理液20uL注入高效液相色谱仪进行分离。1%纯木糖溶液作定位用。根据低聚糖的分离原理,木糖色谱峰后的所有峰为低聚木糖的总和。以其峰面积计算出样液中低聚木糖的含量。
(4)低聚木糖的分离顺序为:
阿拉伯糖(Al)葡萄搪(G1)、木糖(X)、木二糖(X1)、木二糖(X2)、木四塘(X3)、木五糖
(X4)、木六糖(X5)、木七糖(X6).
1.5结果计算
低聚糖的一百分含量:因为各组分均为同系物,所以可用面积归一法计算低聚糖各组分总面积值的百分含量。
低聚木糖%=(x l+x2......x6/Al+G1+X+Xl...... X6)x100
式中:A1:阿拉伯糖
G1:葡萄糖
X:木搪
X1-X6:木二糖—木七搪。
本方法参照:
1、保健食品功效成分检测方法一王亚光主编。(选自Q/YJB0001s-2012)
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