培养条件: 完全培养基:DMEM高糖, 90%; FBS, 10% 培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% 传代方法: 收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。 (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶**后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。 (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。 3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。 注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造 成生长不好。 冻存方法: 冻存液:95%完全培养液,5%DMSO 储存:液氮储存
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