我国中药材资源丰富,药用动植物达1 万余种[ 1 ] ,药材来源复杂,品种划分混乱。许多药材外形类似,加工后容易改变形态结构,传统的中药鉴定手段难以准确鉴别。在中药材市场上,以次充好、以假乱真现象严重。保证药材纯正面临着巨大的挑战,中药材品质鉴定已成为中药质量控制的首要环节。近年来,不少新的技术方法被用于这一领域,其中以DNA 指纹技术、DNA 测序技术为代表的DNA 分子标记技术以其准确性高、重现性好等特点尤为引人瞩目。现就其应用状况综述如下。
1 DNA 指纹图谱技术
1. 1 限制性片段长度多态性( restriction fragment lengthpolymorphism, RFLP) 和扩增片段长度多态性( amplif iedfragment length polymorphism, AFLP) 技术RFL P 技术出现较早,在该领域应用也较早。1997 年,Cheng 等[ 2 ] 采用PCR - RFL P 结合PCR 选择性限制酶谱(PCR - selective restriction , PCR - SR) 分析白术、茅苍术和关苍术核基因组rDNA ITS1 ( internal transcribed spacer ,ITS) 图谱,较易检定三者药材基原。1999 年,Ngan[ 3 ] 等采用PCR - RFL P 方法考察了5. 8S rDNA ITS 区,成功区分出人参属6 种植物及其2 种易混伪品。AFL P 技术在这方面也有应用。2000 年,马小军等[ 4 ]对大马牙、二马牙等5 个人参农家类型的AFL P 图谱进行研究,发现所有类型均有特异条带可作为鉴别特征。同年,罗志勇等[ 5 ]运用这一技术,成功地构建出高质量的人参、西洋参AFL P 图谱,发现北美西
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