土壤样品的分解和溶液中磷的测定
土壤全磷测定要求把无机磷全部溶解，同时把有机磷氧化成无机磷，因此全磷的测定，**步是样品的分解，**步是溶液中磷的测定。
5.2.1.1土壤样品的分解 样品分解有NaCO3熔融法、HClO4—H2SO4消煮法、HF—HClO4消煮法等。目前 HClO4—H2SO4消煮法应用*普遍，因为操作方便，又不需要白金坩埚，虽然HClO4—H2SO4消煮法不及NaCO3融煮法样品分解完全，但其分解率已达到全磷分析的要求。NaCO3熔法虽然操作手续较繁，但样品分解完全，仍是全磷测定分解的标准方法。目前我国已将NaOH碱熔钼锑抗比色法列为国家标准法。样品可在银或镍坩埚中用NaOH熔融是分解土壤全磷（或全钾）比较完全和简便方法。
5.2.1.2溶液中磷的测定 溶液中磷的测定，一般都用磷钼蓝比色法。多年来，人们对钼蓝比色法进行了大量的研究工作，特别是在还原剂的选用上有了很大改革。*早常用的还原剂有氯化亚锡、亚硫酸氢钠等，以后采用有机还原剂如1，2，4-胺基萘酚磺酸、硫酸联氨、抗坏血酸等，目前应用较普遍的是钼锑抗混合试剂。
还原剂中的氯化亚锡的灵敏度*高，显色快，但颜色不稳定。土壤速效磷的速测方法仍多用氯化亚锡作还原剂。抗坏血酸是近年被广泛应用的一种还原剂，它的主要优点是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。如果溶液中有一定的三价锑存在时，则大大加快了抗坏血酸的还原反应，在室温下也能显色。
5.2.1.2.1溶液中磷的测定 加钼酸铵于含磷的溶液中，在一定酸度条件下，溶液中的正磷酸与钼酸络合形成磷钼杂多酸。
H3PO4+12H2MoO4=H3[PMo12O40]+12H2O
杂多酸是由两种以上简单分子的酸组成的复杂的多元酸，是一类特殊的配合物。在分析化学中，主��是在酸性溶液中，利用H3PO4或H4SiO4等作为原酸，提供整个配合阳离子的中心体，再加钼酸根配位使生成相应的12-钼杂多酸，然后再进行光度法、容量法或重量法测定。
磷钼酸的铵盐不溶于水，因此，在过量铵离子存在下，同时磷的浓度较高量，即生成黄色沉淀磷钼酸铵(NH4)3[PMo12O40]，这是质量法和容量法的基础。当少量磷存在时，加钼酸铵则不产生沉淀，仅使溶液略现黄色[PMo12O40]3-，其吸光度很低，加入NH4VO3使生成磷钒钼杂多酸。磷钒钼杂多酸是由正磷酸、钒酸和钼酸三种酸组合而成的杂多酸，称为三元杂多酸H3 (PMo11VO40)·nH2O。根据这个化学式，可以认为磷钒钼酸是用一个钒酸根取代12-钼磷酸分子中的一个钼酸的结果。三元杂多酸比磷钼酸具有更强的吸光作用，亦即有较高的吸光度，这是钒钼黄法测定的依据。但是在磷较少的情况下，一般都用更灵敏的钼蓝法，即在适宜试剂浓度下，加入适当的还原剂，使磷钼酸中的一部分Mo6+离子被还原为Mo5+，生成一种叫做“钼蓝”的物质，这是钼蓝比色法的基础。蓝色产生的速度、强度、稳定性等与还原剂的种类、试剂的适宜浓度特别是酸度以及干扰离子等有关。
5.2.1.2.2还原剂的种类 对于杂多酸还原的产物——钼蓝及其机理，虽然有很多人作过研究，但意见不一致。目前一般认为，杂多酸的蓝色还原产物是由Mo6+和原子构成，仍维持12-钼磷酸的原有结构不变，且Mo5+不再进一步被还原。一般认为磷钼杂多蓝的组成可能为H3PO4·10 MoO3·Mo2O5或H3PO4·8 MoO3·2Mo2O5，说明杂多酸阳离子中有两个或四个Mo6+被还原到Mo5+（有的书上把磷钼杂多蓝的组成写成H3PO4·10 MoO3·2MoO2，这样钼原子似乎被还原到四价，这是不大可能的）。
与钒相似，锑也能与磷钼酸反应生成磷锑钼三元杂多酸，其组成为P:Sb:Mo=1:2:12，此磷锑钼三元杂多酸在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色的络合物，而且还原剂与钼试剂配成单一溶液，一次加入，简化了操作手续，有利于测定方法的自动化。
H3PO4、H3AsO4和H3SiO4都能与钼酸结合生成杂多酸，在磷的测定中，硅的干扰可以控制酸度抑制之。磷钼杂多酸在较高酸度下形成（0.4～0.8mol·L-1，H+），而硅钼酸则在较低
酸度下生成；砷的干扰则比较难克服，所幸，土壤中砷的含量很低，而且砷钼酸还原速度较慢，灵敏度较磷低，在一般情况下，不致影响磷的测定结果。但是在使用农药砒霜量，要注意砷的干扰影响，在这种情况下，在未加钼试剂之前将砷还原成亚砷酸而克服之。
在磷的比色测定中，三价铁也是一种干扰离子，它将影响溶液的氧化还原势，抑制蓝色的生成。在用SnCl2作还原剂时，溶液中的Fe3+不能超过20mg·kg-1，因此过去全磷分析中，样品分解强调用NaCO3熔融或HClO4消化，进入溶液的Fe3+较少。但是用抗坏血酸作还原剂，Fe3+含量即使超过400 mg·kg-1，仍不致产生干扰影响。因为抗坏血酸能与Fe3络合，保持溶液的氧化还原势。因此，磷的钼蓝比色法中，抗坏血酸作为还原剂已广泛被采用。
钼蓝显色是在适宜的试剂浓度下进行的。不同方法所要求的适宜试剂浓度不同。所谓试剂的适宜浓度是指酸度。钼酸铵浓度以及还原剂用量要适宜，使一定浓度的磷产生*深*稳定的蓝色。磷钼杂多酸是一定酸度条件下生成的，过酸与不足均会影响结果。因此在磷的钼蓝比色测定中酸度的控制*为重要。不同方法有不同的酸度范围。兹将常用的三种钼蓝法的工作范围和各种试剂在比色液中的*终浓度列于表5-1。
表5-1 三种钼蓝法的工作范围和试剂浓度
项目 | SnCl2-H2SO4体系 | SnCl2-HCl体系 | 钼锑抗体系 |
工作范围（mg·kg-1，P） | 0.02～1.0 | 0.05～2 | 0.01～0.6 |
显色时间（min） | 5～15 | 5～15 | 30～60 |
稳定性 | 15 min | 20 min | 8h* |
*后显色酸度（mol·L-1，H+） | 0.39～0.40 | 0.6～0.7 | 035～0.55 |
显色适宜温度（℃） | 20～25 | 20～25 | 20～60 |
钼酸铵（g·L-1） 还原剂（g·L-1） | 1.0 0.07 | 3.0 0.12 | 1.0 抗坏血酸0.8～1.5 酒石酸氧锑钾0.024～0.05 |
*见《土壤农业化学常规分析方法》，科学出版社，1983年，P96
上述三种方法SnCl2-H2SO4体系*灵敏，钼锑抗—硫酸体系的灵敏度接近SnCl2-H2SO4体系，而显色稳定，受干扰离子的影响亦较小，更重要的是还原剂与钼试剂配成单一溶液，一次加入，简化了操作手续，有利于测定方法的自动化，因此目前钼锑抗—硫酸体系被广泛采用。
