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生物医学显微摄影具体操作步骤
生物医学显微摄影具体操作步骤
生物显微摄影(Microphotography)是利用摄影装置来拍摄显微镜视野中所观察到的物像。在生物医学方面,主要用于对正常细胞或病变细胞的显微形态学研究记录。具体操作步骤如下:
一 准备步骤
拍摄前作以下预备工作,调整显微镜至*佳状态。
1.光路合轴 使光轴与光束处于同一轴线上。
2.柯勒氏照明 使观察的视野获碍均匀而又充分的照明;防止杂散光对照相系统产生影响。
3.物镜与目镜合理组合 依标本的不同和显微摄影要求,物镜与目镜的组合有一定规范。
4.调整视场光阑和孔径光阑 使两者与所用物镜的数值孔径相等,所得的分辨力*高;视场光阑一旦调好,不要再动,而孔径光阑可随物镜数值孔径的更换,做相应的调整。
二 拍摄步骤
拍摄是显微摄影系列操作中的关键环节,在镜检观察中,发现需要摄下的影像应即时拍照。
1.开启相机后盖,安装胶卷于照相机内。
2.打开显微镜照明装置的电源开关,将亮度调至适当。
3.依个人的视力,调整摄影目镜调焦环至“井”字线清晰。
4.放一片需要拍摄的标本载玻片于载物台上。在低倍镜下选好要拍摄的核型或细胞结构,再转换到油镜下,聚焦标本细节,准备拍照。
5.按下曝光按钮,曝光按钮亮表示曝光开始进行,熄灭表示曝光完毕。
6.拍摄记录
三 胶片冲印步骤
感光胶片在拍摄完毕后,需尽快在暗室中冲洗和晒印,其方法和普通照像相似。
1. 把胶片装入显影罐中(切勿粘在一起)先用清水冲洗,排除气泡.然后再把水倒掉,这有利于显影液的快速均一作用。
2. 从顶部罐口注入预先配好的约250ml D-72式显影液。20℃显影4~12分钟。
3. 显影中轻轻摇影罐,使胶片表面充分受显影液作用,显影完毕,迅速倒出显影液。
4. 立即注入250ml预先配好的SB—I式停影液,停显时间为10秒,倒出停影液,随之加入250ml的F一5式酸性坚膜定影液,20℃定影15分钟。取出胶片流水冲洗30分钟以上。
5. 将胶片挂起,用脱脂棉轻轻吸掉胶片表面过多的积水,晾干。
6. 晾干后用放大机的胶片夹子夹住胶片,药膜面朝下,聚焦取景,然后在红灯条件下,用压纸板压住所需号放大像纸,药膜面向上.进行曝光(适当的曝光时间要经试验后决定)。
7. 曝光后的像纸,浸入D-72显影液中,然后用竹镊子不时地夹住像纸翻动,直到显影适度为止。
8. 显影合适后立即移到SB-I式停影液中,漂洗10~20秒,再浸入定影液中处理15分钟,取出在流水中冲洗60分钟左右。
9. 水洗后,放在电热上光机上烘干;裁边,装入有说明的纸袋内保存。
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