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流式细胞仪激光源和光学系统?
经特异荧光
染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。常用的光源有弧光灯和激光;激光器又以氩离子激光器
为普遍,也有配和氪
离子激光器
或染料激光器。光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。汞灯是*常用的弧光灯,其发射光谱大部分集中于300~400nm,很适合需要用紫外光激发的场合。
氩离子激光器
的发射光谱
中,绿光514nm和蓝光488nm的谱线*强,约占总光强的80%;
氪
离子激光器
光谱多集中在可见光
部分,以647nm较强。**学上使用的一些荧光染料
激发光波长
在550nm以上,可使用染料激光器。将有机染料做为激光器泵浦的一种成份,可使原激光器的光谱
发生改变以适应需要即构成染料激光器。例如用
氩离子激光器
的绿光泵浦含有Rhodamine6**溶液的染料激光器,则可得到550~650nm连续可调的激光,尤在590nm处转换效率
*高,约可占到一半。为使细胞得到均匀照射,并提高分辨率
,照射到细胞上的激光光斑直径应和细胞直径相近。因此需将激光光束经透镜
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