用途:用于O157菌的显色培养,O157菌显亮红色、淡红色或红色
大肠杆菌O157显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、病人粪便样品中O157 菌的快速检测。O157菌显紫色,大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色;其它**显黄色或无色。本培养基的特异性高,可以克服SMAC培养基引起的假阳性和假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
成份 (g/L)
特殊营养物质
|
50.0
|
混合显色剂
|
2.5
|
琼脂
|
15.0
|
pH 7.0 ± 0.1 25 ℃
|
CT 添加剂 1ml/ 支 *5
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 13.5g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 10-20 分钟。冷却至45-50 ℃时,加入 CT 添加剂混匀,
倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中, 37 ℃ 增菌培养18-24 小时;
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到 O157 菌显色培养基上,做 2 个平板;
4 、 37 ℃培养 18-24h , O157:H7 菌显紫色 , 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色,其它**显黄色或无色;
5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡蓝色。制备好的平板呈蓝**固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 18-24h 小时:
质控菌株
|
ATCC
|
生长情况
|
菌落颜色
|
大肠杆菌 O157
|
|
+++
|
紫色
|
金黄色葡萄球菌
|
25923
|
-/+
|
黄色
|
大肠杆菌
|
25922
|
+++
|
暗蓝色
|
沙门氏菌
|
|
+++
|
蓝色
|
奇异变形杆菌
|
|
+++
|
无色
|
方法的局限性
本培养基对典型大肠杆 O157:H7 必须做血清学试验或生化试验。
典型特征
典型 O157:H7 菌显紫色 , 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色。
参考文献
1 、 Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media forthe isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli(serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.
2. U.S. Food and Drug Administration. 1995.Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International,Gaithersburg , MD.
3. Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser (eds.).1992. Compendium of methods for the microbiological examination offood, 3 rded. American Public Health Association, Washington , D.C.