μ-Slide 15 Well 3D
你可以用 μ-Slide 15 Well 3D做更多实验应用,而不仅仅是血管生成和管形成的分析。
* 没有凝胶弯液面形成,出色细胞可视化,所有细胞都在一个焦平面上。
* 适用于各种凝胶(例如 Matrigel®、胶原蛋白和琼脂糖)的 3D 细胞培养。
* 为实验节约成本,每孔仅需要10 μl 凝胶。
一、聚焦每个细胞:μ-Slide 15 Well 3D 的原理
μ-Slide 15 Well 3D 具有专门的设计规格形状,可轻松、方便且可重复地进行管形成分析。它也是发芽测定、**荧光染色和一般 3D 细胞培养的理想选择。
在将凝胶加入内孔并给予时间凝固后,可以将细胞接种在其顶部以进行管形成分析。由于采用了“孔中孔”技术,所需的凝胶量减少到每孔仅 10 μl,是常规多孔板用量的 10%。
此外,没有形成凝胶弯液面。这确保了所有细胞都在一个光学平面上的均匀厚凝胶基质的形成,创造了可重复的细胞培养条件。μ-Slide 15 Well 3D 可与所有常见的水凝胶基质一起使用,例如 Matrigel®、胶原凝胶、琼脂糖凝胶和透明质酸凝胶。
μ-Slide 15 Well 3D 具有 15 个孔,专为低通量测定而设计。对于大规模应用,ibidi 提供 μ-Plate 96 Well 3D。
图片中μ-Slide 15 Well 3D采用了“孔中孔”嵌套式技术,每孔仅 10 μl凝胶,没有形成凝胶弯液面
二、μ-Slide 15 Well 3D 应用广泛
1、管形成试验或血管生成试验:
对于管形成测定 (也称为血管生成测定),将内皮细胞接种在 10 μl 凝胶层(基底膜样表面)的顶部,在那里它们形成毛细管样结构。通常使用Matrigel® 。细胞的管形成能力可用于分析各种**的促血管生成或抗血管生成潜力。
2、3D 细胞培养:
在许多情况下,3D 环境比 2D 细胞培养更接近于体内情况。μ-Slide 15 Well 3D 是一种简单且经济高效的解决方案,用于培养和显微镜检查嵌入凝胶基质中的细胞。凝胶层直接连接到上面的介质储存器,可以通过扩散快速轻松地进行介质交换。
除了只有一种细胞类型的培养物外,还可以在共培养实验中研究不同细胞类型(例如癌细胞和成纤维细胞)的侵袭行为。
或者,可以使用相同或不同的 3D 凝胶基质(例如基质胶或胶原蛋白)创建夹心培养物。
此外,可以固定非粘附细胞,如血细胞或**,以增强显微镜检查。
细胞嵌入3D凝胶基质中
3D细胞共培养
球体实验
3、**荧光染色:
为了分析管形成或 3D 培养实验的结果,可以在 μ-Slide 15 Well 3D 中进行**荧光染色。细胞可以直接在凝胶上或凝胶中固定和染色,然后使用高分辨率显微镜成像。
在 ibidi μ-Slide 15 Well 3D 中培养的成纤维细胞的迁移测定。左侧的细胞分裂并聚合肌动蛋白(绿色)以形成指示迁移方向的前沿。EdU 表示增殖细胞(红色)。细胞核被 DAPI(蓝色)染色。该图像是使用配备 Airyscan 检测器的 Zeiss LSM 880 共聚焦显微镜获取的。图片由意大利的里雅斯特国际基因工程和生物技术中心 (ICGEB) 心血管生物学组的 Ambra Cappelletto 和 Andrea Colliva 提供。
小鼠胚胎背根神经节,在 ibidi µ-Slide 15 Well 3D 中培养,针对 β III 微管蛋白染色。使用配备 IN Cell Investigator 软件(GE Healthcare,英国)的 IN Cell Analyzer 2000 在 i3S BioSciences Screening Unit 获得的图像。图片由 Estrella Do Céu Neto 提供,i3S - Instituto de Investigação e Inovação em Saúde / INEB-Instituto de Engenharia Biomédica,波尔图大学,波尔图,葡萄牙。
4、Focusing Cells聚焦细胞
当使用少于10μl的凝胶填充μ-Slide 15 well 3D的内孔时,可以培养少量细胞并将其聚焦在柔软的凝胶表面上。
5、Low Volume Microscopy Chamber低容量腔室显微镜检
μ-Slide 15 Well 3D也可以用作不含任何凝胶的腔室显微镜检,这对于需要几个微体积孔的实验非常实用。
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