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试剂盒特异性因素有哪些
酶联免疫吸附实验(ELISA试剂盒)自1971年自问世以来,以其敏感性高,特异性强,操作简洁、**,而广泛使用于临床确诊,创始了免疫学确诊的新。但同其它免疫确诊办法一样酶免试剂在它的研讨、生产及运用中常常会碰到非特异性问题。
1、试剂盒特异性要素
1、1 固相载体的挑选。ELISA中常用的固相载体有微量滴定板、小珠和小试管三种,以微量滴定板zui为常见[1]。它具有良好的吸附功能,孔底透明度高,空白值低,各板之间、同一板各孔之间功能附近。聚苯乙烯ELISA板因为原料的不同和制作工艺的差别,各产品的质量差异很大。因而,在挑选试剂盒一起要对其运用的微孔板类型进行认证,评估。
1、2包被物的纯度。在酶联免疫测定尤其是直接ELISA中,试剂的特异性取决于运用抗原的纯度。目前因为技术条件的约束,包被用抗原或抗体的纯度不可能到达100%,所以有些非特异性显色不可避免,只能尽可能进步纯度,进步特异性。目前运用的包被抗原一般为合成多肽抗原。
1、3包被抗体的效价。具有高亲和力和高特异性的包被抗体,是决议试剂特异性的重要方面。
1、4 关闭。是ELISA中重要的一步,目的是关闭固相载体外表尚未被所占有的空地,减少后续过程中非特异性蛋白的干扰。
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