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elispot关于实验步骤

    随着(ELISPOT)酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半衰期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代,国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术(ELISPOT)。
   1. 封闭步骤可用FBS、BSA、酪蛋白等代替脱脂乳,效果会更好,但价格较高,。
   2. 孵育后细胞裂解可使用低盐溶液或去离子水,4℃孵育10分钟,低渗裂解细胞。

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